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柑橘采后因炭疽病（由 Colletotrichum gloeosporioides 引起）损失严重，现有化学杀菌剂问题多。研究人员从瓯柑果皮分离两色离蠕孢 WZU-HOG4，鉴定出 N - 乙酰 - O - 甲基酪氨酸。它能抑制病菌，抗氧化且安全，为柑橘保鲜提供新选择。
柑橘，作为全球备受欢迎的水果，富含大量的抗坏血酸和膳食纤维，深受人们喜爱。然而，在柑橘采后的运输、储存和销售过程中，炭疽病这一 “顽疾” 却成为了果农和商家的心头大患。这种由胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起的病害，不仅会降低柑橘的品质，使其卖相不佳，还可能产生毒素，严重影响消费者的健康。更糟糕的是，它每年都给全球柑橘产业带来了巨大的经济损失，让无数果农的心血付诸东流。
为了应对这一难题，传统的化学合成杀菌剂，如苯菌灵、苯并咪唑类、咪唑类和嘧菌酯等，曾被广泛使用。在过去，苯菌灵（Benlate?）甚至是唯一被证明对控制采后炭疽病有效的注册商业杀菌剂。但随着时间的推移，病原菌逐渐产生了耐药性，这些化学杀菌剂的效果越来越差。而且，化学杀菌剂的高毒性对人体健康构成了威胁，它们在生态系统中的残留也带来了严重的环境风险。因此，寻找安全、有效的替代方法，成为了柑橘保鲜领域亟待解决的问题。
在这样的背景下，温州的研究人员挺身而出，开启了一项意义重大的研究。他们将目光聚焦于从瓯柑（Citrus reticulata cv. Suavissima）果皮中分离出的微生物，试图从中找到对抗炭疽病的 “秘密武器”。经过不懈努力，研究人员从瓯柑果皮中分离出了两色离蠕孢（Bipolaris bicolor）WZU-HOG4，并惊喜地发现它具有显著的抗菌活性。随后，通过生物测定导向的分级分离和代谢物分析，研究人员成功鉴定出一种名为 N - 乙酰 - O - 甲基酪氨酸的活性抗真菌化合物。
这项研究成果意义非凡。N - 乙酰 - O - 甲基酪氨酸的发现，为柑橘采后保鲜提供了一种全新的、安全的选择。它不仅能有效抑制胶孢炭疽菌和其他病原菌的生长，展现出相对广谱的抗真菌活性，还能通过提高瓯柑果实中抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）的活性，降低丙二醛（MDA）含量，减轻果实储存过程中的氧化应激，从而延长柑橘的保鲜期。此外，细胞毒性试验表明，该化合物在测试浓度下对人胚肾 293（HEK-293）细胞是安全的。这一成果为开发新型天然抗菌和抗氧化剂奠定了基础，有望推动柑橘保鲜技术的革新，助力柑橘产业的可持续发展。该研究成果发表在《Food Microbiology》杂志上。
在研究过程中，研究人员运用了多种关键技术方法。首先，从瓯柑果皮中分离真菌时，采用了一系列严谨的样本处理和培养方法，将成熟瓯柑果皮经风干、切割、灭菌等步骤后，在马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基上培养，从而获得真菌菌株。接着，通过生物测定导向的分级分离技术，从两色离蠕孢 WZU-HOG4 的代谢产物中筛选活性成分。最后，利用核磁共振（NMR）和高分辨电喷雾电离质谱（HRESIMS）技术，鉴定出 N - 乙酰 - O - 甲基酪氨酸。
下面来详细看看研究结果：
- 瓯柑果皮真菌的分离与保存：研究人员从浙江温州三垟湿地种植园采集成熟瓯柑果实，将其果皮进行一系列处理，包括风干 24 小时、切成 4mm2 的小块、七步灭菌法消毒等，然后研磨并接种在 PDA 培养基上，在 28°C 培养至菌落形成，再进行分离和纯化，最后将分离菌株保存在马铃薯葡萄糖培养基中。
- 瓯柑果皮真菌分离株的筛选与鉴定：研究人员从健康瓯柑果皮样本中分离出 108 种真菌，其中 27 株对胶孢炭疽菌具有拮抗活性。通过对这 27 株菌株的形态和培养特征分析，对它们进行了分类。
- 活性成分的鉴定与特性研究：经过生物测定导向的代谢物分析，研究人员从两色离蠕孢 WZU-HOG4 的代谢产物中鉴定出 N - 乙酰 - O - 甲基酪氨酸。分子对接分析显示，该化合物与酪氨酸酶的结合亲和力比维生素 C 更强，能有效抑制酪氨酸酶的活性，这表明它在防止果实褐变方面可能具有重要作用。
- 对柑橘果实抗氧化能力的影响：用 N - 乙酰 - O - 甲基酪氨酸处理瓯柑果实后发现，果实中的抗氧化酶 SOD、POD 和 CAT 的活性显著增加，MDA 含量降低，这意味着果实的抗氧化能力增强，在储存过程中的氧化应激得到有效缓解。
- 细胞毒性试验：在对 HEK-293 细胞进行的细胞毒性试验中，结果证实 N - 乙酰 - O - 甲基酪氨酸在测试浓度下是安全的，这为其在柑橘保鲜中的实际应用提供了重要的安全性依据。
综合来看，本研究成功从瓯柑果皮中分离出两色离蠕孢 WZU-HOG4，并鉴定出其活性代谢产物 N - 乙酰 - O - 甲基酪氨酸。该化合物具有抗真菌、抗氧化和安全性高的特点，在柑橘采后保鲜方面展现出巨大的潜力。然而，目前该研究还处于实验室阶段，未来还需要进一步开展更多的研究，如在不同柑橘品种上的应用效果评估、田间试验验证以及大规模生产工艺的优化等，以推动 N - 乙酰 - O - 甲基酪氨酸从实验室走向实际应用，真正为柑橘产业的发展保驾护航。这项研究不仅为解决柑橘采后炭疽病问题提供了新的思路和方法，也为天然抗菌和抗氧化剂的开发开辟了新的方向，在生命科学和健康医学领域具有重要的理论和实践意义。
