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黑鲪(Sebastes schlegelii)因受精不完全导致繁殖受限。研究人员成功建立并培养其精巢支持细胞系(SSTC)至 50 代。经鉴定及转录组分析,发现 SSTC 主要由支持细胞构成,相关信号通路有变化。该研究为黑鲪生殖内分泌研究提供平台。
黑鲪(Sebastes schlegelii)是一种经济价值颇高的鱼类,具有独特的卵胎生繁殖方式,但受精不完全限制了其繁殖。为探究黑鲪精子发生的机制,研究人员成功建立了源自精巢的细胞系,命名为 SSTC。该细胞系在 25℃的 L - 15 培养基中培养,目前已传代至 50 代。
在体外培养过程中,SSTC 呈现出成纤维细胞样和上皮样形态。到第 30 代(P30)时,62% 的 SSTC 仍保持 48 条染色体的二倍体核型。为评估 SSTC 表达外源基因的能力,研究人员进行了脂质转染和电转染实验,转染效率分别达到 9% 和 12%。
转录组分析显示,P15 和 P30 的 SSTC 几乎不表达生殖细胞和间质细胞的标记基因,仅表达支持细胞(Sertoli cell)的标记基因 sox9a、amh、krt18 和 fasl,这表明 SSTC 主要由支持细胞构成。
基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析表明,与原代细胞相比,传代后的 SSTC 中对支持细胞精子发生至关重要的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、转化生长因子 -β(TGF-β)和 Wnt 信号通路显著上调。此外,细胞周期相关通路也有所上调,而细胞黏附、细胞外基质、细胞通讯和膜信号转导相关通路则显著下调。
这项研究表明,SSTC 可作为探索黑鲪性腺分化和发育分子机制的有力工具,为该物种的生殖和内分泌研究提供了一个高效的平台。