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为解决贝西沙星（BN）检测方法存在的不足，研究人员开展以十二烷基硫酸钠（SDS）胶束体系增强 BN 荧光特性的研究。结果显示该方法灵敏度高、线性范围宽，可用于眼科制剂和人工房水检测，为 BN 分析提供了新途径。
在眼科疾病治疗领域，细菌结膜炎（俗称红眼病）较为常见，贝西沙星（Besifloxacin，BN）作为一种广谱氟喹诺酮类抗生素，是治疗细菌结膜炎的常用药物。然而，目前检测 BN 的方法存在诸多问题。比如多数色谱法需要昂贵的高纯度色谱试剂用于洗脱，还依赖专业技术人员操作；光谱法中，分光光度法灵敏度低，以往的荧光光谱技术常需耗时的衍生化反应或基于荧光猝灭机制，影响检测的选择性和灵敏度；电化学方法使用昂贵的纳米材料和复杂的电极修饰，不太适用于常规药物分析。这些问题限制了对 BN 含量的精准检测，进而可能影响药物质量控制和临床治疗效果评估，因此开发一种更优的 BN 检测方法迫在眉睫。
在此背景下，来自埃及多家大学（Minia University、Minia National University、Sohag University）的研究人员开展了相关研究。他们建立并验证了一种超灵敏、选择性好、快速且经济高效的荧光光谱法，用于定量检测眼科制剂和人工房水中的 BN。该研究成果发表在《Journal of Fluorescence》上，为 BN 的检测分析提供了新方向，在药物研发、临床质量控制等方面具有重要意义。
研究人员开展此项研究用到的主要关键技术方法包括：使用 Jasco FP - 8350 荧光分光光度计进行荧光光谱测量，控制发射和激发单色器带宽为 10nm；利用 Jenway 3510 pH 计调节溶液 pH；借助 Mettler Toledo 5 位天平进行称重；通过配制一系列标准溶液构建校准曲线；采用加样回收实验评估方法的准确性。
实验条件优化
- pH 和缓冲液体积的影响：研究人员利用醋酸盐缓冲液（0.2mol/L）探究 pH 对 SDS 胶束体系中 BN 荧光强度的影响，发现 pH 为 3.6 时发射强度最大，因此选定 pH 3.6 为最佳值。在考察缓冲液体积的影响时，发现 1.0mL 醋酸盐缓冲液（pH = 3.6）能使荧光响应达到最大，后续测量便采用此体积。
- 不同表面活性剂的影响：研究 BN 在不同胶束介质（非离子表面活性剂 Tween - 80、β - 环糊精（β - CD），阳离子表面活性剂 CTAB，阴离子表面活性剂 SDS）中的荧光行为，结果显示 SDS 体系显著提高了 BN 分子的发射响应。
- SDS 体积的影响：研究 SDS 体积（2.0% w/v）对 BN 荧光强度的影响，发现 SDS 溶液体积增加至 1.5mL 时，荧光强度随之上升，超过 1.5mL 后无明显变化，故确定 1.5mL 为 2.0% w/v SDS 溶液的最佳体积。
- 稀释溶剂的影响：研究不同稀释溶剂（蒸馏水、甲醇、乙腈、乙醇、丙酮）对存在 SDS 时 BN 荧光强度的影响，结果表明蒸馏水作为稀释溶剂效果最佳，其他醇类因会使胶束变性，导致荧光强度降低。
方法验证
- 线性关系：配制 6 种不同浓度的 BN 标准溶液，每种 3 个平行样，进行胶束增强荧光实验。在 5.0 - 100ng/mL 浓度范围内，相对荧光强度与 BN 浓度呈线性关系，回归方程为Y=8.02Xng/mL?7.19。
- 方法灵敏度：通过公式LOD=3.3σ/S和LOQ=10σ/S计算（其中σ为截距的标准偏差，S 为校准曲线的斜率），得出该方法的检测限（LOD）为 0.64ng/mL，定量限（LOQ）为 1.93ng/mL。
- 准确性和精密度：评估该方法的准确性时，测定了 5 种不同浓度的 BN，回收率在 98.15 ± 1.92% - 103.98 ± 1.01% 之间。在精密度方面，测定了 3 种不同浓度（10、50、100ng/mL）BN 的相对标准偏差（% RSD），结果均小于 2.0%，表明该方法具有良好的精密度和重复性。
实际应用
- 眼科滴眼液中的应用：采用已报道的分光光度法和开发的荧光光谱法同时分析滴眼液中的 BN，通过学生 t 检验和 F 检验对比两种方法的结果，发现计算值和理论值无显著差异，证明新方法具有较高的准确性和精密度。
- 人工房水中的应用：用开发的高灵敏度方法测量人工房水中的 BN，在向房水样本中添加不同浓度的 BN 后进行检测，回收率在 98.82 ± 1.89% - 103.08 ± 1.60% 之间，表明该技术可有效检测人工房水中的 BN 水平。
研究建立了一种基于 SDS 胶束增强的荧光光谱法测定眼科制剂和人工房水中 BN 含量的新方法。SDS 胶束使 BN 的荧光强度显著增强 2.6 倍，优化后的方法线性范围宽（5.0 - 100ng/mL）、检测限低（0.64ng/mL）。与以往方法相比，该方法操作简单、成本低、灵敏度高，无需复杂衍生化或昂贵仪器，为 BN 在眼科制剂中的常规检测提供了新的实用方法，在临床质量控制和制药行业具有潜在应用价值，有助于提升药物质量检测水平，保障眼科用药安全和有效性。
