miRNAs调控Wnt通路基因在乳腺癌亚型中的特异性作用机制及临床意义研究

本研究针对乳腺癌Wnt信号通路异常调控机制，通过分析405例波兰女性五种乳腺癌亚型（Luminal A/HER2+ Luminal B/HER2- Luminal B/非Luminal HER2+/TNBC）组织样本，结合mRNA微阵列、RT-qPCR和ELISA技术，发现APC/CCND1/DVL3/GSK3B/LEF1/WNT5A普遍过表达而FZD4/TCF7L1/TCF7L2下调的分子特征，首次揭示miR-130a/miR-199a/miR-2115/miR-497通过靶向调控GSK3B/TCF7L2/WNT5A等关键基因影响Wnt通路平衡，为乳腺癌亚型特异性治疗提供新靶点。

　　

乳腺癌作为全球女性发病率最高的恶性肿瘤，其分子异质性导致治疗响应存在显著差异。Wnt信号通路作为调控细胞增殖、分化和迁移的核心通路，其异常激活与乳腺癌发生发展密切相关。然而，目前对于不同乳腺癌亚型中Wnt通路成员的表达特征缺乏系统研究，特别是微小RNA（miRNA）对Wnt通路基因的调控机制仍不明确。更关键的是，波兰人群中乳腺癌的分子特征与亚洲或欧美其他人群可能存在差异，这为精准医疗的实施带来挑战。

波兰西里西亚医学院等机构的研究团队在《Scientific Reports》发表的重要研究，首次系统揭示了五种乳腺癌亚型中Wnt通路相关基因的表达谱特征及其miRNA调控网络。通过对405例手术切除的肿瘤组织（包括130例Luminal A、96例HER2阳性Luminal B、100例HER2阴性Luminal B、36例非Luminal HER2阳性及43例三阴性乳腺癌）进行多组学分析，研究人员不仅绘制了不同亚型的分子特征图谱，更发现了miRNA-Wnt通路调控网络与患者预后的潜在关联。

研究采用mRNA微阵列技术筛选Wnt通路相关基因表达谱，通过RT-qPCR验证关键基因表达水平，并利用ELISA检测相应蛋白浓度。miRNA微阵列结合miRDB数据库预测靶向关系，最后通过Kaplan-Meier分析评估基因表达与患者生存期的关联。

基因表达谱分析显示，APC（adenomatous polyposis coli protein）、CCND1（cyclin D）、DVL3（dishevelled segment polarity protein 3）、GSK3B（glycogen synthase kinase-3 beta）、LEF1（lymphoid enhancer binding factor 1）和WNT5A（Wnt family member 5A）在所有亚型中均显著过表达，而FZD4（frizzled family receptor 4）、TCF7L1/2（transcription factor 7 like 1/2）则呈现下调趋势。蛋白水平检测进一步验证了这一发现，其中TCF7L1/2在多数亚型中低于检测阈值。

miRNA靶向预测揭示了关键调控网络：miR-130a下调与CCND1和GSK3B过表达相关（靶标评分95/89）；miR-199a减少导致FZD4抑制和GSK3B激活（靶标评分97/88）；miR-2115上调与TCF7L2抑制相关（靶标评分91）；而miR-497下调则促进WNT5A过表达（靶标评分98）。这些发现首次系统描绘了miRNA-Wnt通路调控网络在乳腺癌中的分子图谱。

生存分析揭示了亚型特异性预后标志物：Luminal A患者中低CCND1/LEF1/TCF7L1/WNT5A与高GSK3B预示不良预后；HER2阳性Luminal B中APC低表达和TCF7L1高表达与生存期缩短相关；HER2阴性Luminal B中GSK3B和TCF7L2下调预示较差结局；非Luminal HER2阳性患者APC过表达和CCND1/WNT5A抑制与预后不良相关；TNBC中APC高表达与生存期缩短显著相关。

讨论部分指出，研究发现Wnt通路成员在不同乳腺癌亚型中呈现特征性表达模式，特别是APC的过表达与传统认知存在差异，可能反映波兰人群的分子特征。miRNA调控网络的解析为理解Wnt通路失衡提供了新视角，如miR-130a-GSK3B-CCND1轴可能成为Luminal型乳腺癌的治疗靶点。值得注意的是，WNT5A过表达与miR-497下调的关联提示非经典Wnt通路激活可能在乳腺癌进展中起重要作用。

该研究的临床意义在于：首次系统描绘波兰人群乳腺癌Wnt通路特征，为区域精准医疗提供依据；发现miRNA-Wnt通路调控网络可作为预后预测体系；揭示APC过表达等特殊现象可能影响治疗策略选择。未来研究可进一步验证这些分子标志物的临床适用性，并开发基于miRNA的靶向干预策略。