K12配体为基础的CD7靶向CAR-T细胞疗法在T细胞恶性肿瘤及急性髓系白血病中的临床前研究

这篇研究报道了基于CD7天然配体K12设计的第三代CAR-T细胞疗法，通过CRISPR/Cas9敲除CD7克服自相残杀效应，在JurkatNFAT-luc报告系统中显示出比scFvCD7 CAR更强的NFAT信号激活能力。该疗法对CD7阳性T-ALL（95%表达）和AML（10%表达）患者来源样本展现剂量依赖性清除效果，在Jurkat白血病小鼠模型中实现60%完全缓解，为复发/难治性（r/r）T细胞恶性肿瘤提供了新型治疗策略。

　　

CD7靶向CAR-T疗法的创新突破

Abstract
研究团队开发了基于CD7天然配体K12的第三代CAR-T细胞（CD28/4-1BB/CD3ζ共刺激结构），通过CRISPR/Cas9敲除T细胞CD7基因解决自相残杀问题。在Jurkat^NFAT-luc报告系统中，K12 CAR的NFAT信号激活强度显著高于传统scFvCD7 CAR（p<0.05），且IFN-γ分泌量提升5倍。该疗法对CD7高表达的T-ALL细胞系（如Molt-4、CEM）清除率达64%-78%，在AML患者样本中可清除80%CD7阳性原始细胞。

Introduction
T-ALL患者5年生存率不足20%，CD7在95%T-ALL和50%外周T细胞淋巴瘤中表达。现有scFvCD7 CAR存在寡聚化风险，而K12与CD7结合亲和力（10-38nM）处于CAR最佳作用范围。临床数据显示第三代CD7 CAR可使r/r T-ALL患者完全缓解率达95%，但AML存在CD7阴性逃逸克隆。

Results

1. 信号激活优势
   K12 CAR^short在Ramos.CD7共培养中发光强度达3.6×10⁴RLU，显著高于scFvCD7 CAR（2.7×10⁴）。CD7刺激后K12 CAR-T分泌IFN-γ约1000pg/mL，是scFvCD7 CAR的5倍。

2. 体外杀伤效能
   在6轮重复杀伤实验中，K12 CAR-T持续清除OVCAR-3.CD7-mCherry细胞，荧光信号衰减率较scFvCD7 CAR低30%。中央记忆T细胞（T_CM）比例达34%，显著高于scFvCD7 CAR组（28%）。

3. 动物模型验证
   NSG小鼠静脉注射Jurkat.luciferase细胞后，K12 CAR-T组60%小鼠（3/5）42天无白血病迹象，而对照组中位生存期仅29天。外周血检测显示CAR-T细胞持续存在（占比20%），骨髓CD7阳性细胞清除率>90%。

Discussion
该研究首次证实配体基CAR在T细胞恶性肿瘤中的优势：

• 低亲和力（38nM）减少T细胞耗竭
• 天然结合特性避免scFv结构域交换
• 第三代共刺激结构增强持久性

临床转化需解决AML中CD7阴性克隆逃逸问题，未来可探索与化疗序贯治疗方案。研究为开发非抗体依赖型CAR提供了重要范式。