攻克致命病毒难题：多种疫苗诱导抗 Bas-Congo 病毒中和抗体的关键突破

为解决 Bas-Congo 病毒（BASV）潜在感染威胁，研究人员开展多种疫苗诱导抗 BASV 中和抗体的研究。结果显示重组痘苗病毒和 H2O2灭活的假型病毒（BASVpv）能有效诱导中和抗体。这为 BASV 疫苗研发提供重要依据。

　　在 2009 年，刚果民主共和国的一场病毒出血热疫情中，一种全新的病毒 ——Bas-Congo 病毒（BASV）悄然现身。这种属于弹状病毒科的病毒，引发了人们的高度警惕。当时，疫情中的患者出现发热、虚弱、头痛等症状，且发病迅速，致死率较高。尽管从幸存者血液样本中检测到 BASV，但遗憾的是，它至今尚未被成功分离，这使得人们对它的了解极为有限。多年来，虽然再未出现大规模的 BASV 疫情，但在首次爆发地曼加拉地区，该病毒的血清阳性率却居高不下，这意味着当地居民仍有持续暴露于病毒的风险。而在其他地区，BASV 的血清阳性率较低，且随年龄增长而升高，种种迹象表明，BASV 在曼加拉地区呈现地方性流行态势。面对 BASV 潜在的致命感染风险，研发有效的疫苗和治疗方法迫在眉睫。

在这样的背景下，日本国立传染病研究所（National Institute of Infectious Diseases）等机构的研究人员勇挑重担，开展了一项意义重大的研究。他们致力于开发针对 BASV 的候选疫苗，并评估其诱导中和抗体的能力。最终研究发现，重组痘苗病毒（recBASV-G/LC16m8）和 H₂O₂灭活的 BASV 假型病毒（H₂O₂-BASVpv）在诱导中和抗体方面表现出色，尤其是 H₂O₂-BASVpv，在接种后能诱导产生高滴度的中和抗体。这一研究成果为 BASV 疫苗的研发指明了方向，具有重要的意义，相关论文发表在《Scientific Reports》上。

研究人员在研究过程中运用了多种关键技术方法。首先是重组蛋白表达技术，通过杆状病毒表达载体系统在 Tn5 昆虫细胞中表达重组 BASV-G 蛋白；其次是基因转染技术，将重组 BASV-G 质粒（BASV-G/pCAGGS）转染到细胞中，确认蛋白表达；再者是病毒构建技术，构建重组痘苗病毒和假型病毒；最后采用动物实验技术，在兔子模型上评估疫苗的免疫效果。

研究结果

1. 疫苗构建与表达确认：研究人员成功构建了 4 种候选疫苗。利用重组杆状病毒在 Tn5 昆虫细胞中表达并纯化出重组 BASV-G 蛋白，通过 SDS-PAGE 和免疫印迹证实其表达。重组 BASV-G 质粒（BASV-G/pCAGGS）转染 HeLa 细胞后，经免疫荧光染色确认 BASV-G 蛋白的表达。重组痘苗病毒（recBASV-G/LC16m8）经多步构建与筛选，通过免疫荧光染色观察到 BASV-G 蛋白的表达。H₂O₂灭活的 BASV 假型病毒（H₂O₂-BASVpv）经透析和超速离心浓缩，免疫印迹显示灭活前后均有 BASV-G 蛋白条带，且灭活后病毒失去感染性。
2. 免疫接种与抗体诱导：对兔子进行不同疫苗的免疫接种实验。重组 BASV-G 蛋白接种 5 次后，兔子血清中和抗体滴度达到 1:400 - 800；DNA 疫苗（BASV-G/pCAGGS）接种后，中和抗体在第 1 或 2 次注射后开始诱导，第 3 次注射后达到平台期，第 5 次注射时滴度达到 1:25,600 - 51,200。重组痘苗病毒（recBASV-G/LC16m8）接种 2 次后，1 个月后中和抗体滴度达到平台期，7 天开始上升，42 天达到峰值 1:25,600 - 51,200。H₂O₂-BASVpv 接种后，10⁸ TU 组从第 2 次接种开始抗体滴度上升，第 3 次接种后达到峰值 1:12,800 - 102,400；10⁹ TU 组从第 1 次接种开始上升，第 2 次接种后达到平台期 1:25,600 - 204,800，且 10⁹ TU 的 H₂O₂-BASVpv 在首次接种后就能有效诱导中和抗体，在 4 种疫苗中诱导中和抗体的能力最强。

研究结论与讨论

此次研究首次针对 BASV 开展候选疫苗的开发研究。结果表明，4 种候选疫苗中，重组痘苗病毒（recBASV-G/LC16m8）和 H₂O₂-BASVpv 在诱导中和抗体方面效果显著。其中，H₂O₂-BASVpv 在接种后诱导产生的中和抗体滴度最高，尤其是 10⁹ TU 剂量组，甚至在首次接种后就能有效诱导抗体产生。这一发现为 BASV 疫苗的进一步研发提供了重要的实验依据和方向。

研究还发现，重组 BASV-G 蛋白诱导中和抗体的能力较弱，可能与该蛋白在昆虫细胞中的糖基化差异有关，也可能受到其在 2M 尿素溶液中的溶解性影响。而痘苗病毒 LC16m8 株作为高度减毒且免疫原性良好的疫苗株，基于其构建的重组痘苗病毒（recBASV-G/LC16m8）在诱导中和抗体方面表现出色，且单剂量接种就能诱导产生较高的抗体滴度。此外，H₂O₂灭活病毒作为一种安全有效的疫苗策略，在 BASV 疫苗研发中得到了验证。

不过，这只是 BASV 疫苗研发的初步成果。未来还需要进一步研究评估有效候选疫苗诱导的 T 细胞反应，深入探索疫苗的保护机制，优化疫苗配方和接种方案，为应对 BASV 潜在的疫情爆发提供更有力的保障。