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为解决太白贝母(Fritillaria taipaiensis)鳞茎腐烂病问题,研究人员开展内生解淀粉芽孢杆菌 SJ22 对该病生物防治及机制的研究。结果发现 SJ22 抑菌效果显著,还能诱导植株抗性。这为防治该病提供新途径,对太白贝母种植意义重大。
在中药材种植的领域中,太白贝母作为一种具有重要药用价值的植物,有着悠久的应用历史。它被广泛用于缓解咳嗽、消除痰液和降低血压等方面,是传统中医药中不可或缺的一部分。然而,随着人工种植规模的不断扩大,一个棘手的问题逐渐凸显 —— 由镰刀菌(Fusarium spp.)引起的鳞茎腐烂病愈发猖獗。这种病害严重影响了太白贝母的产量和质量,成为制约其产业发展的关键因素。
长期以来,化学杀菌剂一直是防治该病害的主要手段。但化学杀菌剂的频繁使用带来了诸多隐患,不仅会在药材中残留,威胁人体健康,还会对生态环境造成破坏。因此,寻找一种绿色、安全、有效的替代方法迫在眉睫。在这样的背景下,生物防治逐渐进入人们的视野,成为研究的热点方向。
为了攻克太白贝母鳞茎腐烂病这一难题,来自国内的研究人员展开了深入探索。他们将研究聚焦于内生细菌,期望从中找到能够对抗镰刀菌的 “生物武器”。经过不懈努力,研究人员从健康的太白贝母鳞茎组织中成功分离出一株内生细菌,命名为 SJ22。经过一系列研究,他们发现 SJ22 对镰刀菌具有显著的拮抗作用,为太白贝母的健康生长带来了新的希望。该研究成果发表在《Biological Control》杂志上,为太白贝母鳞茎腐烂病的防治提供了重要的理论依据和实践指导。
研究人员在此次研究中,运用了多种关键技术方法。首先是微生物分离与鉴定技术,从太白贝母鳞茎中分离出 SJ22 菌株,并通过形态学观察、生理生化实验以及 16S rDNA 和 gyrB 基因序列分析等手段对其进行鉴定。其次,采用毒力测定和盆栽实验评估 SJ22 的生物防治效果。再者,运用扫描电子显微镜(SEM)观察病原菌形态变化,利用转录组测序分析 SJ22 诱导植物抗性的分子机制。
研究结果
- SJ22 的分离及拮抗效果:研究人员通过双培养法,成功分离出 SJ22 菌株。它对 F. solani、F. oxysporum 和 F. avenaceum 表现出强大的拮抗活性,菌丝抑制率分别高达 89.96% ± 1.05%、87.50% ± 0.40% 和 84.35% ± 0.29%。同时,SJ22 的细胞 - free 上清液(CFS)也能有效抑制病原菌菌丝生长,且呈剂量依赖性。
- SJ22 的鉴定:通过对 SJ22 的形态学观察,发现其菌落呈奶油白色、不透明,表面粗糙,边缘不规则。SEM 观察显示其菌体为短杆状至椭圆形。革兰氏染色呈紫色,确定为革兰氏阳性菌。此外,SJ22 具备产生多种水解酶的能力,包括蛋白酶、淀粉酶等,还能产生铁载体和溶解磷。综合这些特征及 16S rDNA 和 gyrB 基因序列分析,最终将 SJ22 鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。
- SJ22 的基因组测序:对 SJ22 进行全基因组测序后发现,其基因组约为 4,043,680 bp,GC 含量为 46.04%。基因预测显示有 4346 个编码基因和 114 个非编码基因。进一步分析发现,SJ22 含有 26 个次级代谢物生物合成基因簇(BGCs),其中部分与已知抗菌化合物相关。
- SJ22 的生物防治潜力:盆栽实验表明,SJ22 对太白贝母鳞茎腐烂病具有良好的防治效果。感染 F. oxysporum 的植株在接种 SJ22 后,病情指数显著降低,生物量增加。同时,SJ22 产生的挥发性有机化合物(VOCs)在体内实验中也表现出显著的抗真菌活性,能有效减少病原菌感染面积。
- SJ22 的作用机制:SJ22 能显著抑制病原菌孢子萌发和芽管生长,使孢子萌发率大幅降低。同时,SJ22 会导致病原菌菌丝形态发生明显变化,出现肿胀、畸形、分支增多和断裂等现象。此外,SJ22 还破坏了病原菌细胞膜的完整性,使其细胞膜通透性增加。SJ22 产生的 VOCs 在体外对多种病原菌也具有不同程度的抑制作用,抑制率在 28.36% - 59.12% 之间。
- SJ22 对太白贝母抗性的诱导:SJ22 处理太白贝母后,植株体内防御酶(如苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD))的活性显著增加。转录组分析表明,SJ22 处理后,太白贝母中差异表达基因(DEGs)显著富集在苯丙烷生物合成、植物激素信号转导等途径。RT-qPCR 验证了相关基因的表达变化,进一步证实 SJ22 通过激活乙烯(ET)/ 水杨酸(SA)信号通路,增强了太白贝母对病原菌的抗性。
研究人员从太白贝母鳞茎中成功分离出解淀粉芽孢杆菌 SJ22,它对镰刀菌引起的太白贝母鳞茎腐烂病具有显著的生物防治效果。其作用机制包括抑制病原菌生长和诱导植物抗性两个方面。SJ22 不仅能通过产生代谢产物抑制病原菌孢子萌发、破坏菌丝形态和细胞膜完整性,还能激活太白贝母体内的防御相关基因和信号通路,增强植株的免疫力。这一研究成果为太白贝母鳞茎腐烂病的防治提供了一种安全、有效的生物防治方法,有望减少化学杀菌剂的使用,促进太白贝母产业的可持续发展。未来,还需要进一步深入研究 SJ22 产生的潜在活性物质,以及其杀菌和免疫诱导的详细机制,为开发更高效的生物防治产品奠定基础。