NAMPT介导的HCLS1蛋白去乙酰化促进儿童慢性髓系白血病细胞克隆性生长的机制研究

本研究针对儿童慢性髓系白血病（CML）患者长期酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗导致的毒性和耐药性问题，通过揭示NAMPT（烟酰胺磷酸核糖转移酶）通过去乙酰化激活造血特异性HCLS1蛋白（造血细胞Lyn底物1）的分子机制，提出靶向NAMPT/HCLS1通路可抑制CML细胞克隆形成和增殖，为儿童CML治疗提供新策略。

　　

慢性髓系白血病（CML）是一种由BCR::ABL1融合基因驱动的血液系统恶性肿瘤，尽管酪氨酸激酶抑制剂（TKI）如伊马替尼的应用显著改善了成人患者的预后，但儿童CML患者面临更长的治疗周期、更高的耐药风险以及生长障碍等毒性问题。这背后的生物学机制尚不明确，亟需探索儿童CML特有的分子靶点。

针对这一挑战，来自德国图宾根大学医院的研究团队在《Experimental Hematology》发表了一项突破性研究。他们发现，儿童CML患者的单核细胞中NAMPT（烟酰胺磷酸核糖转移酶）水平显著升高，并通过STAT5依赖的转录激活机制促进NAMPT表达。NAMPT通过生成NAD⁺激活去乙酰化酶Sirtuins（SIRTs），进而去乙酰化修饰造血特异性蛋白HCLS1（K241位点），激活其功能。这一过程不仅驱动CML细胞的克隆性增殖，还通过上调白血病起始细胞（LIC）标志物IL1RAP和Wnt通路转录因子LEF-1维持恶性表型。

研究团队运用了多种关键技术：1）临床样本分析（6例初诊儿童CP-CML患者骨髓/外周血单核细胞）；2）基因报告实验（NAMPT启动子活性检测）；3）斑马鱼异种移植模型评估药物效果；4）体外克隆形成（CFU）和长期培养起始细胞（LTC-IC）实验；5）位点定向突变（HCLS1 K241突变体构建）和shRNA敲降。

研究结果
1. 儿童CP-CML患者单核细胞中NAMPT水平升高
通过Western blot和qRT-PCR证实，初诊儿童CML患者的NAMPT和HCLS1表达显著高于健康对照。机制上，BCR::ABL1通过激活STAT5结合NAMPT启动子的三个位点驱动其转录，伊马替尼处理可逆转这一效应。

2. NAMPT抑制消除CML细胞存活能力
特异性抑制剂FK866在体外（CML-T1细胞系）和斑马鱼移植模型中均显著减少CML细胞增殖，并降低细胞内NAD⁺水平。值得注意的是，3 nM FK866即可完全抑制患者来源CD34⁺细胞的LTC-IC活性，但对健康供体造血干细胞无毒性。

3. HCLS1通过K241去乙酰化被激活
序列分析发现HCLS1的K241位点在进化中高度保守。构建K241突变体后，CML细胞对FK866的敏感性降低，且特异性抗体证实NAMPT抑制会减少HCLS1 K241去乙酰化。

4. NAMPT/HCLS1通路调控LEF-1和IL1RAP
FK866处理下调LEF-1及其靶基因（如survivin和c-myc）的表达。更重要的是，NAMPT抑制或HCLS1敲降显著减少IL1RAP⁺细胞比例——这类细胞被认为是CML白血病起始细胞的关键群体。

结论与意义
该研究首次揭示NAMPT介导的HCLS1去乙酰化是儿童CML细胞存活的核心机制，并提出靶向该通路可同时清除常规CML细胞和LIC群体。由于HCLS1的造血组织特异性，其抑制剂可能避免非血液系统毒性。这一发现为儿童CML的精准治疗提供了新思路：联合TKI与NAMPT抑制剂或可缩短疗程、减少耐药，尤其对易进展为急变期的患者具有重要临床价值。未来需进一步探索HCLS1调控IL1RAP的具体分子机制及在成人CML中的适用性。