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为解决橡子仁淀粉(AKS)中鞣质对生物转化的抑制问题,研究人员探索原位调控策略。他们用牛奶蛋白络合鞣质,显著提高酶解产率,且 3% 鞣质对葡萄糖生物转化有双向调控作用,对山区经济发展意义重大。
在当今追求可持续发展的时代,能源与资源问题备受关注。随着化石能源日益枯竭,寻找可再生资源来开发各类产品成为了全球科研的热点方向。在众多可再生资源中,植物资源因其丰富性和可再生性备受青睐。橡子,作为一种广泛生长在山区的非食用木本森林坚果资源,蕴含着巨大的开发潜力。它富含淀粉,其淀粉含量在植物界中仅次于谷物,远高于豆类 ,理论上是生物炼制的优质原料。然而,橡子中含有大量的鞣质,这一成分却成为了橡子资源高效利用的 “拦路虎”。
鞣质是一类广泛存在于植物中的多酚类化合物,具有抗氧化、抗炎、抗菌和抗癌等多种生物学特性。但在生物炼制过程中,它却 “画风突变”,展现出很强的生物抑制作用。由于其分子结构中含有大量的酚羟基,鞣质能够与蛋白质、氨基酸等含氮物质通过氢键或范德华力相互作用,形成沉淀,这就严重干扰了淀粉的酶解过程。不仅如此,鞣质作为常见的抑菌剂,对许多微生物的生长具有显著抑制作用,进而影响整个生物转化过程,使得橡子仁淀粉(AKS)难以实现高价值、高质量的利用。这种现状既造成了橡子这种可再生资源的浪费,也限制了生物炼制产业的进一步发展,更不利于山区经济的振兴。因此,如何克服鞣质的阻碍,充分挖掘橡子淀粉的价值,成为了亟待解决的科学难题。
在这样的背景下,为了攻克这一难题,来自未知研究机构的研究人员开展了一项极具创新性的研究。他们以 α- 淀粉酶和糖化酶的酶解以及葡萄糖氧化杆菌(Gluconobacter oxydans)的全细胞催化为背景生物技术,致力于实现 AKS 的绿色低碳加工利用。研究人员提出并建立了一种原位调控策略,利用廉价的牛奶蛋白作为牺牲蛋白,与鞣质进行络合,从而实现了可溶性鞣质的原位沉淀和分离。
经过一系列实验,研究取得了令人瞩目的成果。在酶解过程方面,该原位分离方法显著减轻了鞣质对酶解的抑制作用,酶解产率从 75.8% 大幅提升至 89.4%。在后续的生物转化阶段,3% 的鞣质对葡萄糖氧化杆菌(Gluconobacter oxydans)转化葡萄糖的过程具有双向调控作用,有效减少了因内源性代谢过程导致的葡萄糖消耗。在牺牲 1.14% 牛奶蛋白的情况下,从 1000g 含鞣质的原料中获得了 273.3g 2 - 酮基葡萄糖酸(2-kGA)和 104.3g 5 - 酮基葡萄糖酸(5-kGA),以淀粉为基础计算产率达到 77.9%,以水解产生的葡萄糖为基础计算产率更是高达 92.1%。
这项研究成果意义非凡。从资源利用角度看,它为橡子淀粉的高效利用开辟了新途径,减少了可再生资源的浪费;从产业发展角度讲,有力地推动了生物炼制产业的升级,为以橡子为原料生产高附加值产品提供了技术支持;从社会经济层面出发,加速了橡子替代传统粮食资源的进程,对贫困山区和林区的经济繁荣具有重要意义,有望为当地创造更多的就业机会,带动区域经济发展。该研究成果发表在《Food Bioscience》上,引起了相关领域的广泛关注。
研究人员在开展研究时,主要运用了以下关键技术方法:首先是原料采集,橡子采自中国贵州省罗甸县(25.43°N,106.76°E;海拔 800 - 900m)的栓皮栎(Quercus variabilis)。其次是利用牛奶蛋白络合鞣质进行原位沉淀分离,通过控制牛奶蛋白的添加量实现对鞣质浓度的调控。然后采用 α- 淀粉酶和糖化酶对淀粉进行酶解,利用葡萄糖氧化杆菌(Gluconobacter oxydans)进行葡萄糖的生物转化,测定各阶段产物的含量及产率。
下面具体来看研究结果:
- 鞣质对淀粉酶解的生物抑制作用:研究发现,与谷物淀粉相比,AKS 不仅淀粉含量略低,更重要的是其含有高达 7.1% 的鞣质,这严重限制了 AKS 的利用和开发。通过对比实验,清晰地展示了鞣质在淀粉酶解过程中的阻碍作用。
- 原位调控策略的效果:在添加 1.14 wt% 牛奶蛋白作为牺牲蛋白后,成功实现了橡子淀粉中可溶性鞣质的原位沉淀,将鞣质浓度调控至 3%。这一操作显著缓解了鞣质对酶解过程的抑制,使得酶解产率大幅提高。
- 鞣质对葡萄糖生物转化的影响:实验表明,3% 的鞣质对葡萄糖氧化杆菌(Gluconobacter oxydans)转化葡萄糖具有双向调控作用。一方面,它能有效减少因内源性代谢导致的葡萄糖消耗;另一方面,在该鞣质浓度下,生物转化生成了大量的 2 - 酮基葡萄糖酸(2-kGA)和 5 - 酮基葡萄糖酸(5-kGA),产率可观。
研究结论部分明确指出,作为谷物淀粉的优质替代品,AKS 加工技术的研究对促进地方经济增长、增加就业机会意义重大,尤其是对林区和山区的经济发展。该研究建立的原位调控策略,有效解决了 AKS 中鞣质的生物抑制问题,提高了橡子资源的经济和社会效益,为橡子基高附加值产品的开发以及林区和山区的经济振兴提供了重要的理论依据和技术支持。
在讨论部分,研究人员进一步强调了该研究成果的创新性和实用性。原位调控策略的提出,为解决其他含有生物抑制成分的生物质资源利用问题提供了新思路。同时,研究也为后续深入研究鞣质在生物转化过程中的作用机制以及优化原位调控策略奠定了基础。这一研究成果不仅为生物炼制领域带来了新的突破,也为可持续发展理念在资源利用方面的实践提供了成功范例,有望推动相关产业朝着更加绿色、高效的方向发展。