高效农杆菌介导桔梗遗传转化与基因编辑:解锁功能基因组与种质改良新途径
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时间:2025年05月13日
来源:Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC) 2.3
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桔梗(Platycodon grandiflorum)遗传转化多局限于转基因毛状根。研究人员开展桔梗遗传转化及优化研究,建立了农杆菌介导的转化体系,利用含 Wus2和 ZmBBM2基因的载体提高了转化效率,还实现基因编辑。该研究为桔梗研究和种质改良提供平台。
桔梗(Platycodon grandiflorum)是全球广泛种植的观赏花卉,也是常用的传统药用植物和食品原料。然而,其遗传转化大多仅用于生产转基因毛状根。在这项研究中,科研人员建立并优化了桔梗的遗传转化方案。他们利用携带 pCambia3301 质粒的根癌农杆菌(A. tumefaciens )菌株 EHA105 优化转化条件,以叶片外植体进行转化,效率达到 6.77%。此外,科研人员开发了发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)介导的转化系统,使用含有形态发生调节基因 Wus2和 ZmBBM2的三元载体 p3301WusBBM。这一方法显著提高了毛状根诱导率和植株再生效率,分别达到 43.75% 和 21.88%,有效解决了桔梗转化中再生效率低的难题。进一步地,结合优化后的发根农杆菌介导转化系统与 CRISPR/Cas9 技术,科研人员成功对桔梗内源性基因 chr2.2745 进行精准编辑,基因组编辑效率达 16.70% 。该研究为桔梗的遗传转化和基因组编辑搭建了高效平台,有助于推动深入的功能基因组学研究,促进种质改良。
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