多重实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定 Toll 样受体(TLRs)基因表达水平的研究进展与意义
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时间:2025年05月13日
来源:Molecular Biology 1.5
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免疫反应基因表达分析中数据标准化单一标准的选择问题尚未解决。研究人员选取HPRT1、SDHA等为候选参考基因,开发多重实时 RT-PCR 系统分析。用相关算法构建稳定指数,用于 TLRs 基因表达水平归一化,证实该系统适用于免疫反应基因表达分析。
免疫反应基因表达分析在宿主与病原体相互作用研究中至关重要。当前已有多种方法,但数据归一化单一标准选择问题仍未解决。研究选取HPRT1、SDHA、GAPDH和TBP作为表达稳定的候选参考基因,开发了基于多重实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的分析系统。利用 geNorm 和 BestKeeper 算法计算,基于HPRT1和SDHA两个基因创建了稳定指数。该指数用于归一化目标 Toll 样受体基因(TLRs)TLR1、TLR2、TLR4、TLR6和TLR8的表达水平。在健康个体样本中,观察到 TLR 基因(除TLR6外)表达值具有高稳定性和正相关,这表明存在共同的表达调控机制,也证实了该多重系统适用于免疫反应基因表达分析。
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