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肝细胞癌（HCC）死亡率攀升，现有检测技术存在局限。研究人员开发血浆壳聚糖酶 3 样蛋白 1（CHI3L1）检测试剂盒，探究其与多种指标联合诊断 HCC 的价值。结果显示联合检测价值更高，该研究对 HCC 早诊早治意义重大。
在全球范围内，癌症一直是威胁人类健康的重大疾病，而肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma，HCC）更是其中的 “狠角色”。近年来，HCC 的死亡率持续上升，如今已位居全球癌症相关死亡原因的第三位，每年约有 80 万人因此失去生命。早期的 HCC 若能及时发现，是有可能被有效控制甚至治愈的；然而，一旦病情发展到晚期，治疗手段极为有限，患者预后情况很差。
目前，用于 HCC 检测的技术，无论是基于生物标志物的检测，还是影像学检查，都存在一些问题。现有的生物标志物检测方法，要么特异性不足，要么灵敏度欠佳；影像学筛查虽然能发现一些肿瘤，但对于早期微小肿瘤的检测能力也有待提高。临床症状、常规体检、影像学检查以及普通实验室指标，单独使用时都难以精准检测出 HCC，这常常导致患者错过最佳治疗时机。因此，开发安全、特异性高且灵敏的非侵入性血清学检测标志物或标志物组合，对 HCC 的早期发现、优化治疗方案以及评估预后都具有至关重要的意义。
为了攻克这些难题，江南大学附属医院等机构的研究人员开展了一项关于 HCC 诊断的研究。他们致力于开发一种血浆壳聚糖酶 3 样蛋白 1（Chitinase-3-like Protein 1，CHI3L1）检测试剂盒，并探究 CHI3L1、D - 二聚体（DD）、纤维蛋白降解产物（FDP）、甲胎蛋白异质体（AFP-L3）和维生素 K 缺乏或拮抗剂 - II 诱导蛋白（PIVKA-II）在 HCC 诊断中的价值。研究结果显示，开发的 CHI3L1 化学发光检测试剂盒性能良好，达到了临床要求。同时，研究发现 CHI3L1 可作为肝癌早期筛查的指标，且 DD、FDP、AFP-L3、PIVKA-II 和 CHI3L1 这五个指标联合检测的诊断价值高于单一检测。这一研究成果发表在《BMC Biotechnology》上，为 HCC 的诊断和治疗带来了新的希望和方向。
研究人员在开展这项研究时，主要运用了以下关键技术方法：首先，采用化学发光法开发 CHI3L1 检测试剂盒，利用双抗体夹心原理，通过一系列反应步骤，最终检测发光值来确定 CHI3L1 浓度；其次，选取了 200 例在江南大学附属医院接受治疗的 HCC 患者和 100 例同期进行体检的健康人作为研究对象，收集他们的临床和病理数据以及血液样本；最后，运用 SPSS 26.0 和 Graph Pad Prism 10.0 软件对数据进行分析，通过绘制受试者工作特征（ROC）曲线来评估各指标的诊断效能。
下面详细介绍研究结果：
- CHI3L1 化学发光检测试剂盒的开发
- 抗体工作浓度优化：通过棋盘法筛选配对抗体，确定在生物素抗体浓度为 2ng/mL、辣根过氧化物酶（HRP）抗体浓度为 1.5ng/mL 时，各标准品信号值最佳，成本也得到有效控制。
- 最佳孵育时间：经过实验发现，37℃孵育 30min 时，CHI3L1 各校准品信号值较高，检测效率得以提升，因此将此作为反应条件。
- 性能指标：该试剂盒最低检测限为 1.50ng/mL，精度和准确度在 10% 以内，相关系数 R＞0.99，线性回归方程为 y = 0.9855x + 0.8343。与临床参考试剂盒相比，相关性良好，相关系数 R 为 0.994，各项性能均满足临床需求。
- 血清标志物在肝细胞癌检测中的结果
- 研究亚组情况：研究涉及 200 例肝癌患者，其中男性 149 例，女性 51 例，60 岁及以上人群占比 72%，疾病严重程度达 I 期的有 28 例，II 期 45 例，III-IV 期 127 例。
- 指标与年龄、性别的关系：DD、FDP 和 CHI3L1 水平与年龄无关，AFP-L3 和 PIVKA-II 在 45 - 59 岁年龄组显著高于其他组；所有指标水平在性别上无显著差异。
- 指标与一般病理的关系：肿瘤直径＞5cm、中高分化、有神经侵犯、淋巴结转移或远处转移的患者，其 DD、CHI3L1、FDP 水平显著升高；PIVKA-II 仅在有远处转移的患者中显著升高；AFP-L3 在各肿瘤特征分组中无显著差异。
- 指标与 HCC 分期的关系：晚期（III-IV 期）患者的 DD、FDP 和 CHI3L1 水平显著高于早期（I-II 期）患者，而 AFP-L3 和 PIVKA-II 在分期上无显著差异。
- 单个和联合诊断价值：单个诊断分析中，CHI3L1 的受试者工作特征曲线下面积（AUC）为 0.923，具有较高的诊断价值；联合诊断时，五个指标联合的 AUC 达到 0.961，显著优于单个指标。
研究结论和讨论部分指出，寻找可靠的血清学诊断和预后指标对肝癌的诊断和检测意义重大。AFP-L3、PIVKA-II、CHI3L1 联合 DD 和 FDP，可作为 HCC 患者早期无创检测方法，对伴有凝血异常、乙肝感染或肝硬化的患者意义重大。考虑到患者经济负担，AFP-L3、PIVKA-II 和 CHI3L1 联合检测可作为肝癌早期诊断指标。CHI3L1 在肿瘤直径＞5cm、有淋巴结转移和神经侵犯的患者中升高，有望用于肝癌患者的预后评估。此外，研究也指出了目前检测方法存在的一些挑战，如需要专业仪器，可能增加医疗机构经济负担，在基层医院和偏远地区普及困难等，为后续研究指明了方向。总之，这项研究为 HCC 的早期诊断和治疗提供了重要的依据和新的思路，对推动肝癌诊疗领域的发展具有重要意义。
