Dark 切片技术:荧光显微镜背景去除与光学切片的创新突破
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时间:2025年05月13日
来源:Nature Methods 36.1
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在荧光显微镜中,散焦背景影响细胞细节观察。研究人员开展 Dark 切片技术研究,该技术借助暗通道先验和双频分离实现单帧光学切片,能有效去除背景,提升图像信噪比和结构相似性指数,有助于深层组织分析,意义重大。
Dark 切片算法(Dark sectioning algorithm)可在荧光显微镜(fluorescence microscopy)中去除背景,实现单帧光学切片。它能提升定量分析水平和深层组织分割精度,还与多种成像模式兼容。在荧光显微镜领域,一直存在散焦背景掩盖细胞细节、引入伪影的难题。Dark 切片技术受自然图像去雾启发,利用暗通道先验(dark channel prior)和双频分离(dual frequency separation)实现单帧光学切片。与降噪或反卷积不同,它专门针对并去除离焦背景,能稳定将图像信噪比提升近 10 dB,结构相似性指数(structural similarity index measure)提高约 10 倍。该技术在宽场、共聚焦、二维 / 三维结构光照和单光子 / 双光子显微镜中均得到验证,可实现高保真重建。此外,它还能提高深层组织的分割精度,在小鼠大脑神经元识别、前列腺病变或小鼠脑切片细胞核准确评估方面效果显著。Dark 切片技术与光片显微镜、光场显微镜等多种显微镜模态兼容,也能和反卷积、超分辨光学涨落成像(super-resolution optical fluctuation imaging)等处理算法协同工作。
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