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为解决膀胱癌治疗难题，研究人员开展了纳米脂质体（NLs）携带反义 miR-21、miR-373 对膀胱癌 HTB-9 细胞基因表达影响的研究。结果显示相关 miRNA 和靶基因表达显著降低，表明可利用此技术调控膀胱癌基因网络，为治疗提供新策略。
膀胱癌（Bladder cancer，BC）是全球范围内严重威胁人类健康的疾病，在男性泌尿系统癌症中尤为高发。目前，膀胱癌的治疗手段主要包括化疗、手术和放疗，但对于晚期患者而言，5 年生存率依旧很低。尽管科研人员在膀胱癌治疗领域投入了大量精力，新的有效治疗方案仍亟待开发。
微小核糖核酸（MicroRNAs，miRNAs）作为一类长度在 21 - 25 个核苷酸的小分子 RNA，在基因表达调控中发挥着关键作用。它们能通过诱导靶 mRNA 降解，在转录后水平实现对基因表达的调控。越来越多的证据表明，miRNAs 与癌症的发生发展密切相关，在癌症的病因学和发病机制中扮演重要角色。其中，miR-21 和 miR-373 在膀胱癌患者体内呈现上调状态，且参与细胞周期调控、凋亡、增殖、转移以及耐药等多个过程，对膀胱癌的恶性发展影响重大。
为深入探究 miR-21 和 miR-373 在膀胱癌中的作用机制，来自国外的研究人员开展了一项研究，相关成果发表于《Biochemistry and Biophysics Reports》。研究人员旨在考察膀胱癌 HTB - 9 细胞系在暴露于含有反义 miR - 21、反义 miR - 373 或二者组合的纳米脂质体（NLs）后，基因表达谱的变化情况。
研究人员运用了多种关键技术方法。首先，从 NCBI 获取 miR - 21 和 miR - 373 的序列，借助 Oligowalk 在线服务器筛选并合成最佳的反义寡核苷酸（ASOs）。之后，将 ASOs 包裹进脂质体，利用动态光散射（DLS）和透射电子显微镜（TEM）对其进行表征。接着，培养 HTB - 9 细胞并使其暴露于不同处理组，处理 24 小时后，提取总 RNA 并合成 cDNA，运用定量逆转录聚合酶链反应（qRT - PCR）分析 miR - 21、miR - 373 及 8 个核心基因（STK38L、PCDH19、YOD1、PRDM11、CROT、LATS2、ZNF845、ZC3H6）的表达水平，同时采用 Western blotting 技术对部分基因表达结果进行验证。
研究结果如下：
- ASOs 的优化与选择：依据 OligoWalk 服务器的 ASO 评分和热力学数据，确定了针对 miR - 21 的 AUCUCAUGGCAACACCAGU 和针对 miR - 373 的 AAGUGCUUCGAUUUUGGGG 为最佳 ASOs。
- 相关基因的鉴定与选择：借助 miRDB 服务器，筛选出与 miR - 21 和 miR - 373 相关的基因，最终确定了 8 个核心研究基因。
- 基因表达水平分析：qRT - PCR 和 Western blotting 结果显示，与对照组相比，暴露于纳米脂质体包裹的 ASOs（NL - ASOs）的 HTB - 9 细胞中，miR - 21 和 miR - 373 的表达水平显著降低。同时处理组（NL - ASOmiR - 21 + ASOmiR - 373）的 miR - 21 和 miR - 373 表达下降更为明显。此外，所有研究的 8 个核心基因在暴露于 NL - ASOs 的 HTB - 9 细胞中表达均显著降低，同时处理组的基因表达下降幅度更大。
- ASOs 和 NLs 的表征：合成的 ASOs 大小在 10 - 54nm，平均小于 30nm；合成的 NLs 大小在 100 - 265nm，平均小于 200nm，且呈均匀球形。
研究结论表明，miR - 21 和 miR - 373 在膀胱癌基因表达调控中至关重要，抑制它们能够显著改变膀胱癌基因网络的表达谱。这一研究为膀胱癌的治疗提供了新的方向，即利用 miRNAs 和精心设计的 ASOs 递送系统，有望成为调控膀胱癌基因网络表达的有效策略。
在讨论部分，研究人员指出，虽然目前针对寡核苷酸疗法的研究众多，但在实际应用中仍面临诸多挑战，如药物易降解、半衰期短、细胞摄取困难、存在脱靶效应、毒性问题以及生产制造复杂等。不过，反义寡核苷酸在基础研究和癌症治疗领域依旧潜力巨大，未来可探索其与化疗、免疫治疗等联合治疗的可能性。
综上所述，该项研究在膀胱癌治疗研究领域具有重要意义，为后续探索更有效的膀胱癌治疗方案奠定了理论基础，有望推动膀胱癌治疗从传统模式向基于基因调控的精准治疗转变，为膀胱癌患者带来新的希望 。
