南印度自制与市售凝乳中益生菌的表征、分子鉴定及二甲双胍对其增殖的影响分析

本研究针对南印度家庭自制凝乳(HMC)、市售凝乳(CC)和口服益生菌补充剂(CP)中的益生菌特性展开系统分析，通过16S rRNA测序鉴定出Lactobacillus等4属25株菌，首次揭示二甲双胍(5-60 mmol/L)不影响菌株生长但改变细胞粘附特性，为糖尿病患者益生菌-降糖药联用提供理论依据。

　　

在全球益生菌市场蓬勃发展的背景下，南印度家庭每日食用的凝乳(curd)作为传统发酵乳制品，其益生功效尚未得到系统评估。更关键的是，尽管益生菌已被临床用于糖尿病辅助治疗，但常用降糖药二甲双胍(metformin)与益生菌的相互作用机制仍是空白。这一知识缺口可能影响数亿糖尿病患者的微生物群干预策略——据国际糖尿病联盟统计，印度糖尿病患者已超过7700万，其中90%使用二甲双胍。

为解答这些问题，喀拉拉中央大学的研究团队在《Food Bioscience》发表了一项开创性研究。他们首次对南印度家庭自制凝乳(HMC)、市售凝乳(CC)和商业益生菌补充剂(CP)中的微生物进行多维度分析，并创新性地引入二甲双胍处理实验。通过表型筛选、分子鉴定和药物干预实验的三重验证，发现所有来源的菌株均保持对二甲双胍(5-60 mmol/L)的生长稳定性，但HMC菌株在30 mmol/L药物浓度下表现出更强的A549细胞粘附能力，这为理解地域性饮食微生物与药物的互作提供了新视角。

研究团队运用三大关键技术：1) 10^-1至10^-4梯度稀释法从8份样本分离菌株；2) 16S rRNA测序进行分子鉴定；3) MTT法检测二甲双胍处理的细胞活力变化。样本队列包含3种HMC、3种CC和2种CP，确保来源多样性。

【样本收集和细菌分离】
从不同家庭和商场采集的凝乳样本显示，CP组菌株具有最优的胆汁酸耐受性，而CC组更易形成生物膜。所有菌株均对抗生素敏感，符合益生菌安全标准。

【表型特征分析】
25株分离菌中，乳酸杆菌(Lactobacillus)占比最高(14株)，其次是肠球菌(Enterococcus)(5株)。值得注意的是，HMC1菌株在酸性环境下的存活率比CC组高32%，暗示家庭发酵可能保留特殊菌株。

【二甲双胍影响】
突破性发现在于：不同浓度二甲双胍(5-60 mmol/L)均未抑制细菌增殖，但MTT显示5 mmol/L时CP组细胞活力降低17%。更惊人的是，HMC菌株在30 mmol/L药物作用下，对肺上皮细胞(A549)的粘附力提升2.3倍，这种"药物增强效应"在CC/CP组未观察到。

【讨论与结论】
该研究首次证实：1) 南印度凝乳富含符合WHO/FAO标准的益生菌，尤其是家庭自制产品；2) 二甲双胍治疗剂量不影响益生菌存活，但改变其宿主互作模式；3) HMC菌株的药物增强粘附特性，可能源于长期饮食选择压力形成的独特代谢通路。这些发现为开发地域适配型益生菌-降糖药联合方案奠定基础，同时提示传统发酵食品可能是新型益生菌的宝库。

研究最后强调，未来需深入解析二甲双胍调控益生菌粘附的分子机制(如表面蛋白表达变化)，并建议扩大样本量验证HMC菌株的地域特异性。这项来自喀拉拉中央大学的工作，为全球糖尿病微生物组研究提供了重要的亚洲数据，也为传统食品微生物资源开发树立了新范式。