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为解决 MTZ 长期使用有毒性且缺乏同时测定 MTZ 和 PRP 方法的问题，研究人员开展用 TLC 法测定纯品及加标人血浆中 MTZ 和 PRP 的研究。结果显示该方法准确、环保。其意义在于满足临床检测需求，保障患者安全。
在医学领域，甲状腺功能亢进症（简称甲亢）是一种常见的内分泌疾病，患者体内甲状腺激素分泌过多，会引发一系列健康问题。甲巯咪唑（Methimazole，MTZ）作为治疗甲亢的常用药物，通过抑制甲状腺过氧化物酶的活性，减少甲状腺激素（甲状腺素
T4和三碘甲状腺原氨酸
T3 ）的合成，从而控制病情。然而长期使用 MTZ 可能导致粒细胞缺乏症、肝炎、关节炎和皮疹等不良反应，因此对血浆中 MTZ 的定量监测至关重要。普萘洛尔（Propranolol，PRP）作为一种 β - 肾上腺素能受体拮抗剂，常与 MTZ 联合使用，用于控制甲亢患者的心动过速症状，改善患者的健康状况。但此前，尚无同时测定 MTZ 和 PRP 的方法。为了解决这一问题，来自埃及贝尼苏韦夫大学（Beni - Suef University）药学院药物分析化学系的研究人员 Raghda A. Emam、Aml A. Emam、Rehab M. Abdelfatah 和 Basma H. Anwar 开展了相关研究，研究成果发表在《BMC Chemistry》上。
研究人员采用的关键技术方法主要有：利用薄层色谱 - 密度测定法（TLC - densitometric approach），通过优化实验条件，对 MTZ 和 PRP 进行分离和定量分析；以醋酸氢化可的松（Hydrocortisone acetate，HCA）作为内标物，消除基质效应的影响；运用多种评估工具，如生态规模评估（Eco - scale assessment，ESA）、绿色分析程序指数（Green analytical procedure index，GAPI）、分析绿色度指标法（Analytical greenness metric approach，AGREE）和实用性指标法（Practicability metric approach，BAGI），对所建立方法的绿色性进行评价。
方法优化
研究人员对展开剂组成和比例、检测波长、内标物以及扫描光束狭缝尺寸进行了优化。通过测试不同的展开剂，发现以乙酸乙酯：丙酮：33% NH3溶液（9 : 1 : 0.05，体积比）作为展开剂时，能实现 MTZ 和 PRP 的良好分离，峰形对称。在检测波长的选择上，254nm 波长下检测灵敏度最高且噪音最低。经过对多种潜在内标物的测试，最终确定 HCA 为最佳内标物，其峰形对称且与其他成分峰分离度良好。狭缝尺寸优化为 (6×0.45) mm 时，能有效消除相邻峰的干扰，提高检测灵敏度。
方法开发与验证
通过绘制峰面积比（药物峰面积 / 内标峰面积）与浓度的校准曲线，结果显示在 0.04 - 1.0μg/band 范围内，PRP 校准曲线呈线性；在 0.1 - 1.0μg/band 范围内，MTZ 校准曲线呈线性。该方法的各项验证参数均符合美国食品药品监督管理局（US - FDA）的要求，如 PRP 和 MTZ 的定量下限（LLOQ）分别为 0.06μg/band 和 0.1μg/band，定量上限（ULOQ）均为 1.2μg/band ；准确度方面，MTZ 的回收率在 96.01 - 100.72% 之间，PRP 的回收率在 100.39 - 104.44% 之间；精密度良好，MTZ 的相对标准偏差（RSD）在 1.479 - 1.730% 之间，PRP 的 RSD 在 1.517 - 1.982% 之间。此外，该方法还具有良好的特异性、选择性、稳定性和提取回收率，系统适用性参数也符合要求，证明了方法的可靠性。
绿色度评估
采用多种评估工具对该 TLC 方法进行绿色度评估。生态规模评估（ESA）结果显示，该方法获得了 80 分的生态规模等级，表明其对环境和人类健康的影响较小。绿色分析程序指数（GAPI）评估显示，该方法由四个绿色、九个黄色和两个红色部分组成，证明其对环境和人类健康的影响可接受。分析绿色度指标法（AGREE）评估得分为 0.73，颜色为浅绿色，表明该方法具有绿色性和生态友好性。实用性指标法（BAGI）评估得分为 75，颜色为浅蓝色，也表明该方法是一种对环境和人类健康友好的分析方法。综合评估结果表明，该 TLC 方法是一种绿色环保的分析方法。
研究结论与讨论
研究人员成功开发了一种以 HCA 为内标，同时测定 MTZ 和 PRP 在混合样品及加标人血浆中含量的灵敏绿色 TLC 技术。该方法具有快速、简便、经济、环保的优点，所需样品和试剂量少。所有验证参数均符合 US - FDA 验证生物分析方法的接受标准。通过多种工具进行的绿色度评估表明，新提出的 TLC 方法对人类和自然生命几乎没有负面影响。这一研究成果为临床监测 MTZ 和 PRP 的血药浓度提供了一种可靠的分析方法，有助于医生更好地调整用药剂量，减少 MTZ 长期使用带来的不良反应，保障患者的用药安全，在临床治疗和药物监测领域具有重要的应用价值。
