合成肽类药物中先天免疫反应调节杂质（IIRMI）的免疫原性风险评估：以利拉鲁肽为例

本研究针对合成肽类药物中痕量先天免疫反应调节杂质（IIRMI）可能引发的免疫原性风险，通过建立PBMC（外周血单核细胞）检测体系，对比分析了合成与重组利拉鲁肽的免疫原性差异。结果显示两类药物无统计学显著差异，为肽类药物杂质风险评估提供了新方法，对保障生物类似药安全性具有重要意义。

　　

糖尿病治疗领域，胰高血糖素样肽-1（GLP-1）类似物利拉鲁肽通过葡萄糖依赖性刺激胰岛素分泌，成为2型糖尿病的重要治疗手段。随着2024年6月FDA对合成利拉鲁肽仿制药的暂批，其与原研重组产品制造工艺差异引发的潜在免疫原性问题引发关注。痕量先天免疫反应调节杂质（Innate Immune Response Modulating Impurities, IIRMI）可能激活外周血单核细胞（PBMC），导致细胞因子释放、抗原摄取增加等连锁反应，甚至影响药物安全性和疗效。

为评估这一风险，海博制药公司资助的研究团队在《Biochemical and Biophysical Research Communications》发表论文，建立了一套基于新鲜志愿者PBMC的检测体系。研究采用不同保质期（12个月和32个月）的合成利拉鲁肽与重组产品（10-12个月和30-32个月）进行对比，通过密度梯度离心法分离PBMC，以0.25x10⁶细胞/孔的密度培养，结合TLR/NOD配体刺激实验，检测11种细胞因子（包括IL-1β、TNF-α等）表达水平。

关键实验技术：研究采用新鲜分离的人PBMC替代传统细胞系，通过流式细胞术和Luminex多重检测技术分析免疫激活标志物；建立药物最大浓度筛选模型以避免假阴性；对比新出厂与加速老化批次样本，评估储存时间对免疫原性影响。

PBMC分离与刺激实验显示，新鲜分离的PBMC经Ficoll-Hypaque梯度离心后，在含10%热灭活FBS的RPMI培养基中培养，细胞活性保持良好。药物浓度筛选实验证实，合成利拉鲁肽中常见辅料（如甘露醇、聚山梨酯）降解产物未引起显著细胞毒性。

讨论部分指出，尽管合成工艺可能产生序列错误的肽段杂质，但通过严格的纯化控制，其免疫原性风险与重组产品相当。该PBMC检测体系相比传统方法，能更敏感地捕捉痕量未知杂质的免疫激活效应，为肽类药物质量评估提供了新思路。研究特别感谢IMMUNI T的检测服务及Veritas IRB的伦理审核，实验方案经Dr. Luc Villeneuve等专家评审。

这项研究的意义在于：首次系统比较了合成与重组利拉鲁肽的免疫原性差异，证实严格质控下两者风险相当；建立的PBMC检测模型为肽类药物杂质风险评估树立了新标准；研究结果支持了合成肽类药物在保障安全性前提下的可替代性，对推动优质仿制药发展具有重要指导价值。