CLK2-SOX3复合体通过SGLT1介导内皮细胞代谢重编程促进脉络膜新生血管的机制研究

本研究针对抗VEGF疗法应答不全的湿性年龄相关性黄斑变性（AMD）患者，揭示了CLK2-SOX3-SGLT1轴调控内皮细胞代谢重编程的新机制。研究人员通过激光诱导CNV小鼠模型和缺氧BMECs模型，结合CUT&Tag、代谢组学等技术，发现SOX3通过靶向sglt1启动子序列TCTTTGTCTG/ATTGCCTC促进糖酵解，其功能受CLK2介导的Ser97位点磷酸化调控。该研究为AMD的靶向治疗提供了新策略。

　　

年龄相关性黄斑变性（AMD）是全球55岁以上人群视力丧失的主因，其中湿性AMD因异常血管增生导致不可逆损伤。尽管抗血管内皮生长因子（VEGF）疗法取得进展，约40%患者存在应答不全，表现为持续渗液、出血或纤维化。这一临床困境提示：除VEGF通路外，必然存在其他调控脉络膜新生血管（CNV）的关键机制。

复旦大学团队在《Cellular Signalling》发表的研究中，创新性地将目光投向代谢重编程领域。既往研究显示，内皮细胞90%能量依赖糖酵解，但缺氧条件下调控这一过程的分子开关尚未明确。研究人员通过激光诱导CNV小鼠模型和钴氯化物（CoCl₂）模拟缺氧的脑微血管内皮细胞（BMECs）体系，结合siRNA干扰、双荧光素酶报告基因、CUT&Tag染色质分析等技术，系统解析了SOX3转录因子在病理血管生成中的核心作用。

SOX3介导缺氧诱导的BMECs功能激活
激光CNV模型显示SOX3在新生血管区显著高表达。体外实验证实，缺氧条件下SOX3促进BMECs增殖、迁移和成管能力，而siRNA敲降可抑制上述表型。免疫组化显示SOX3 siRNA组CNV面积减少38.7%，提示其直接参与血管生成调控。

CLK2-SOX3-SGLT1级联调控机制的发现
质谱分析揭示CDC样激酶2（CLK2）与SOX3特异性结合。突变实验证实CLK2通过磷酸化SOX3 Ser97位点驱动其核转位。CUT&Tag技术精准定位SOX3在sglt1启动子的结合序列（TCTTTGTCTG/ATTGCCTC），双荧光素酶报告基因验证该结合可激活转录。

SGLT1驱动的代谢重编程
代谢组学显示SGLT1敲除导致BMECs糖酵解中间体（如6-磷酸果糖）减少50%，同时三羧酸循环代谢物积累。脂质代谢中甘油磷脂合成通路受抑，而氨基酸代谢中谷氨酰胺利用率下降，证实SGLT1是代谢重编程的核心效应器。

该研究首次构建了CLK2-SOX3-SGLT1信号轴，阐明转录因子通过调控葡萄糖转运体重构能量代谢的精确机制。临床意义在于：①为抗VEGF耐药患者提供潜在治疗靶点；②揭示SGLT1抑制剂（如糖尿病药物）在AMD中的跨界应用前景；③证实代谢干预可打破病理性血管的"瓦氏效应"循环。未来研究可探索SOX3抑制剂与抗VEGF的协同效应，或开发针对TCTTTGTCTG/ATTGCCTC序列的基因编辑策略。