M7：一种极具潜力的结直肠癌治疗新星 —— 靶向 CDK1 抑制肿瘤进展

结直肠癌死亡率高，耐药性限制靶向治疗效果。研究人员开展 M7 对结直肠癌作用的研究，发现 M7 可抑制 HCT116 和 Lovo 细胞增殖、迁移，促进凋亡，靶向 CDK1 致 G2/M 期阻滞，为结直肠癌药物开发带来新希望。

　　在医学领域，结直肠癌（Colorectal Cancer，CRC）犹如一颗 “定时炸弹”，严重威胁着人类健康。全球范围内，其发病率和死亡率逐年攀升，成为令人头疼的难题。目前，针对结直肠癌的治疗手段虽多，像内镜切除术、手术切除、放疗、靶向治疗和免疫治疗等，但效果却不尽如人意。手术切除对早期患者有一定作用，可很多患者确诊时已处于晚期，无法从中获益。化疗联合靶向治疗和放疗，如 5 - 氟尿嘧啶（5 - FU）联合苏木精，响应率也仅约 20% 。这表明，急切需要新的治疗药物来打破这一困境。

细胞周期的精准调控对维持细胞正常生理功能至关重要，它与肿瘤发生有着千丝万缕的联系。细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）家族，作为丝氨酸 / 苏氨酸激酶，是癌症药物开发的热门靶点。其中，CDK1 在细胞周期的 G₂/M 期调控中独一无二，不可或缺。而且，越来越多研究发现，CDK1 在癌细胞发展过程中也扮演着重要角色，参与了结直肠癌的细胞增殖、定居形成、迁移和凋亡等过程，是结直肠癌治疗的关键靶点。

在此背景下，研究人员开展了关于 M7 对结直肠癌作用的研究。该研究成果发表在《European Journal of Medicinal Chemistry Reports》上。

为了深入探究 M7 在结直肠癌中的作用，研究人员采用了多种技术方法。首先是网络药理学分析，从多个数据库收集潜在靶点信息，预测 M7 - 疾病靶点关系；接着利用分子对接评估 M7 与候选蛋白的结合亲和力；通过 ADP - Glo?激酶实验等体外酶活性检测，验证 M7 对相关蛋白的抑制作用；同时运用多种细胞实验，如 MTT 检测细胞存活、克隆形成实验评估细胞增殖能力、伤口愈合实验观察细胞迁移情况等，全面探究 M7 对结直肠癌细胞的影响。

研究结果如下：

• M7 对结直肠癌细胞的杀伤活性：通过 MTT 实验发现，M7 对 HCT116 细胞和 Lovo 细胞具有较好的肿瘤细胞杀伤活性，其半数抑制浓度（IC₅₀）分别为 5.455 μM 和 9.029 μM。
• GO 和 KEGG 通路分析：经网络药理学分析，确定了 280 个 M7 与结直肠癌相关的交集靶点。这些靶点涉及的生物学过程包括凋亡过程、细胞增殖和细胞迁移等癌症发展相关过程；细胞组分涵盖多种与细胞功能相关的部分；分子功能包含蛋白结合、蛋白丝氨酸 / 苏氨酸激酶活性等；KEGG 通路显示这些靶点均与肿瘤相关。
• 抑制结肠癌细胞增殖：克隆形成实验和 CFSE 染色实验表明，M7 能显著抑制 HCT116 和 Lovo 细胞的增殖，且呈浓度和时间依赖性。药物浓度为 0 μM 时，克隆形成率超 60%，10 μM 时细胞几乎全部死亡。
• 影响结肠癌细胞迁移：伤口愈合实验和蛋白质免疫印迹（Western blot）实验显示，M7 可阻碍 HCT116 和 Lovo 细胞的迁移。M7 处理后，细胞愈合边界变宽，且 Snail 和 Vimentin 蛋白表达水平降低，这两种蛋白与细胞迁移能力密切相关。
• 促进结肠癌细胞凋亡：Annexin V - FITC/PI 双染法和 Western blot 实验表明，M7 能促进 HCT116 和 Lovo 细胞凋亡。随着 M7 浓度增加，凋亡细胞比例上升，Bax 蛋白表达上调，Bcl - 2 蛋白表达下调。
• 筛选和验证 M7 的潜在靶点：构建蛋白质 - 蛋白质相互作用网络，筛选出 CDK1、CDK2、CDK4 和 MAPK1 等潜在靶点。分子对接显示 M7 与这些蛋白有良好结合亲和力。细胞周期实验发现 M7 使结直肠癌细胞阻滞在 G₂/M 期，ADP - Glo?发光实验进一步验证 M7 的作用靶点可能是 CDK1。

研究结论表明，M7 能有效抑制结直肠癌细胞的增殖和迁移，促进其凋亡，并使细胞周期阻滞在 G₂/M 期。通过一系列实验证实，CDK1 很可能是 M7 的作用靶点，M7 通过与 CDK1 相互作用，干扰细胞周期调控，促进细胞死亡，展现出作为抗结直肠癌药物的潜力。

不过在讨论部分，研究人员也指出，虽然 M7 在体外实验中表现出色，但体内环境复杂，免疫系统、药物代谢和细胞间相互作用等因素都会影响其效果。而且，M7 作用机制可能还有未被发现的因素，比如它或许还与其他蛋白或通路相互作用，影响细胞周期阻滞和凋亡。因此，还需开展体内动物研究和临床试验，进一步评估 M7 的疗效、安全性和作用机制，从而更准确地了解其在结直肠癌治疗中的价值。

这项研究为结直肠癌治疗开辟了新方向，M7 有望成为攻克结直肠癌的有力武器，但要真正应用于临床，还需要科研人员不断探索和努力。