RNA结合蛋白YTHDF3通过调控EZRIN影响胃癌细胞迁移及紫杉醇治疗响应的分子机制研究

本研究聚焦胃癌(GC)治疗难题，揭示了m6A阅读蛋白YTHDF3通过调控EZRIN(EZR)表达影响癌细胞迁移和紫杉醇(PTX)敏感性的新机制。团队通过临床样本分析结合CRISPR-Cas9基因编辑技术，证实YTHDF3高表达与化疗响应显著相关，并发现其通过m6A依赖性方式稳定EZR mRNA，调控细胞骨架重组和纺锤体定向。该研究为GC靶向治疗提供了新策略，发表于《Gastric Cancer》。

　　

胃癌作为全球癌症相关死亡的第四大原因，五年生存率不足35%，其治疗面临巨大挑战。近年来，RNA表观遗传修饰N⁶-甲基腺苷(m⁶A)在肿瘤进展中的作用备受关注，但m⁶A阅读蛋白在胃癌中的具体机制仍属空白。葡萄牙波尔图大学等机构的研究团队发现，在m⁶A调控网络中，YTHDF3可能是影响胃癌恶性表型的关键分子开关。

研究团队采用多组学技术开展系统性探索：通过331例胃癌患者的免疫组化分析临床相关性；利用CRISPR-Cas9构建YTHDF3敲除细胞模型；结合RNA-seq筛选下游靶点；采用SELECT技术精确定位m⁶A修饰位点；并通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型验证体内治疗效果。

YTHDF3在胃癌中的表达特征
生物信息学分析显示YTHDF3是胃癌组织中最显著高表达的m⁶A阅读蛋白。临床样本验证发现60.4%病例呈现YTHDF3高表达，且与肠型胃癌显著相关。生存分析揭示重要临床价值：YTHDF3高表达患者接受辅助化疗后中位生存期从14个月提升至35个月，提示其可作为化疗响应预测标志物。

YTHDF3缺失的细胞表型
基因编辑获得的△YTHDF3细胞显示形态学异常：AGS细胞巨细胞减少，SNU638细胞伪足消失。F-actin染色显示细胞骨架紊乱，迁移能力下降50%以上。更重要的是，低氧环境下KO细胞存活率显著降低，提示YTHDF3帮助肿瘤适应恶劣微环境。

EZRIN的调控机制
RNA-seq发现细胞迁移相关通路富集，其中细胞骨架调节蛋白EZR表达下降2倍。实验证实YTHDF3直接结合EZR mRNA的3'UTR区m⁶A位点（位点2161甲基化程度达对照4倍），通过RNA稳定性调控其表达。免疫荧光显示△YTHDF3细胞中EZR及其磷酸化形式几乎消失。

纺锤体定向与药物敏感
YTHDF3缺失导致纺锤体角度从18°增大至33°，呈现显著紊乱。这种异常使细胞对紫杉醇敏感性提升3.5倍（IC₅₀从17.8μM降至5.1μM）。CAM模型证实△YTHDF3移植瘤体积缩小40%，且对紫杉醇响应增强。通过EZR抑制剂NSC668394可完美模拟该表型，而EZR过表达则逆转药物敏感性。

这项研究首次阐明YTHDF3-EZR轴在胃癌中的核心作用：YTHDF3通过m⁶A修饰维持EZR表达，进而调控细胞骨架动态和纺锤体定向，最终影响转移能力和化疗响应。该发现不仅为胃癌分层治疗提供新生物标志物，更提示靶向m⁶A调控网络可能成为克服化疗耐药的新策略。研究团队特别指出，YTHDF3在肠型胃癌中的优势表达暗示其可能参与特定分子亚型的发病机制，这为后续精准治疗研究指明了方向。