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非小细胞肺癌（NSCLC）中 circRNA 功能机制尚不明确。本研究聚焦 circ-MBOAT2/miR-664b-3p/TLK1 轴，发现 circ-MBOAT2 高表达促进 NSCLC 细胞增殖、EMT 及免疫逃逸，其通过吸附 miR-664b-3p 上调 TLK1。研究为 NSCLC 诊疗提供新靶点。
肺癌作为全球癌症死亡的主要原因，其中非小细胞肺癌（NSCLC）占比约 85%，尽管治疗手段不断进步，患者五年生存率仍低于 25%，迫切需要新的预后生物标志物和精准治疗策略。免疫逃逸是肿瘤的基本特征之一，严重影响治疗效果，而环状 RNA（circRNA）因结构稳定且在肿瘤中广泛失调，成为潜在的研究靶点。此前研究发现 circ-MBOAT2 在结直肠癌、胰腺癌等多种癌症中起促癌作用，但其在 NSCLC 中的分子机制尚不清楚。基于此，山东第一医科大学第二附属医院的研究人员开展了相关研究，旨在揭示 circ-MBOAT2 在 NSCLC 中的临床意义及分子机制，研究成果发表在《Hereditas》。
研究人员收集了 97 例 NSCLC 组织及癌旁组织，采用 RT-qPCR、Western blot 等技术检测基因表达，并通过细胞转染、双荧光素酶报告基因实验、RNA 免疫沉淀（RIP）等验证分子间相互作用。同时利用 CCK-8、EdU、Transwell 等实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力，通过荷瘤裸鼠模型评估体内肿瘤生长，还借助外周血单个核细胞（PBMCs）共培养实验分析免疫逃逸相关指标。
结果
1. circ-MBOAT2 在 NSCLC 中高表达且与恶性特征相关
RT-qPCR 显示，circ-MBOAT2 在 NSCLC 组织和细胞系中显著上调，其表达与肿瘤大小、分化程度、TNM 分期及淋巴结转移密切相关。核质分离和荧光原位杂交（FISH）证实 circ-MBOAT2 主要定位于细胞质，RNase R 和放线菌素 D 实验验证其环状结构及稳定性。
2. 沉默 circ-MBOAT2 抑制 NSCLC 细胞恶性行为及免疫逃逸
敲低 circ-MBOAT2 后，CCK-8、EdU 实验显示细胞增殖受阻，流式细胞术检测到凋亡率增加，Transwell 实验证实迁移和侵袭能力下降。Western blot 显示上皮标志物 E-cadherin 表达升高，间质标志物 N-cadherin、Vimentin 降低，表明上皮 - 间质转化（EMT）受抑制。PBMCs 共培养实验表明，沉默 circ-MBOAT2 可增加 CD8? T 细胞比例及 TNF-α、IFN-γ 分泌，减少 IL-10 分泌，抑制免疫逃逸。荷瘤裸鼠模型显示，circ-MBOAT2 敲低组肿瘤体积和重量显著减小。
3. circ-MBOAT2 通过吸附 miR-664b-3p 发挥作用
生物信息学预测及双荧光素酶报告基因实验证实，circ-MBOAT2 与 miR-664b-3p 存在结合位点，RIP 实验进一步验证两者相互作用。NSCLC 组织中 miR-664b-3p 表达下调，且与 circ-MBOAT2 呈负相关。抑制 miR-664b-3p 可逆转 circ-MBOAT2 敲低对 NSCLC 细胞的抑制作用，表明 circ-MBOAT2 通过海绵吸附 miR-664b-3p 调控下游通路。
4. TLK1 是 miR-664b-3p 的直接靶基因
生物信息学及双荧光素酶报告基因实验显示，miR-664b-3p 直接靶向 TLK1 mRNA 的 3'UTR。NSCLC 组织中 TLK1 高表达，与 miR-664b-3p 呈负相关，与 circ-MBOAT2 呈正相关。敲低 TLK1 可抑制细胞增殖、EMT 和免疫逃逸，而过表达 TLK1 则能逆转 miR-664b-3p 模拟物对 NSCLC 细胞的抑制作用。
结论与讨论
本研究揭示 circ-MBOAT2 在 NSCLC 中通过吸附 miR-664b-3p，解除其对 TLK1 的抑制，从而促进细胞增殖、EMT 和免疫逃逸。该研究首次明确 circ-MBOAT2/miR-664b-3p/TLK1 轴在 NSCLC 中的调控机制，为 NSCLC 的诊断和治疗提供了新的生物标志物和潜在靶点。尽管研究存在样本类型和机制深度的局限，但其发现为靶向 circRNA 的肿瘤免疫治疗策略提供了重要理论依据，有望推动 NSCLC 精准医疗的发展。
