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针对传统化学合成银纳米颗粒(AgNPs)存在毒性与环境危害问题,研究人员以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AMD2024 为媒介,利用黑糖蜜、甜菜渣等农业废弃物合成 AgNPs。结果显示颗粒尺寸低至 4.849 nm,IC??为 200 mg/mL,为绿色合成及废弃物利用提供新路径。
在纳米科技与生物医药领域,银纳米颗粒(Silver Nanoparticles, AgNPs)因独特的物理化学性质(如高表面积、良好分散性)展现出广泛应用潜力,但其传统合成方法(如化学还原、物理溅射)依赖有毒试剂且产生环境污染物,亟需绿色可持续的替代方案。与此同时,农业工业废弃物(如果皮、糖蜜、乳清)的大量堆积不仅造成资源浪费,还带来环境污染问题。如何将这些废弃物转化为高附加值材料,成为循环经济与绿色化学的关键挑战。
为解决上述问题,埃及艾因夏姆斯大学(Ain Shams University)农业微生物学系的研究团队开展了一项创新研究。他们利用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)AMD2024 菌株,以黑糖蜜、甜菜渣、香蕉皮、乳清等农业废弃物为底物,探索生物合成 AgNPs 的可行性,并对合成颗粒的特性及细胞毒性进行系统评估。该研究成果发表在《BMC Microbiology》,为 AgNPs 的绿色生产与农业废弃物资源化利用提供了重要科学依据。
研究采用的关键技术方法包括:
- 紫外 - 可见光谱(UV-Vis):检测 AgNPs 的表面等离子体共振(SPR)特性,验证合成过程。
- 动态光散射(DLS):测定颗粒尺寸与分布,评估合成颗粒的均质性。
- X 射线衍射(XRD):分析晶体结构,确认银纳米颗粒的晶型特征。
- 高分辨率扫描电子显微镜(HR-SEM):观察颗粒形态,验证其球形结构。
- 傅里叶变换红外光谱(FTIR):鉴定参与合成的官能团,揭示生物分子的作用机制。
- 细胞毒性实验:采用 MTT 法检测 AgNPs 对正常肾上皮细胞(ccl-81)的半数抑制浓度(IC??),评估生物安全性。
研究结果
1. AgNPs 的生物合成与表征
通过紫外 - 可见光谱分析,发现合成的 AgNPs 在 450 nm 处有显著 SPR 吸收峰,表明成功形成银纳米颗粒。DLS 结果显示,以葡萄糖为对照时颗粒尺寸为 15.63 nm,而利用黑糖蜜作为底物时,颗粒尺寸可进一步减小至 4.849 nm,表明不同废弃物成分对颗粒生长有调控作用。HR-SEM 图像显示,AgNPs 呈球形且分散均匀,证实了生物合成的稳定性。XRD 分析检测到银的特征衍射峰,同时发现少量副产物(如 Ag?CO?、Ag?O),提示合成条件仍需优化。FTIR 结果显示,氨基(N-H)、羟基(O-H)、碳碳双键(C=C)等官能团参与了银离子的还原与颗粒稳定,表明枯草芽孢杆菌分泌的蛋白质与代谢物是关键生物媒介。
2. 农业废弃物对合成效率的影响
研究比较了六种农业废弃物的合成效能,发现黑糖蜜(尤其是甘蔗黑糖蜜)因富含还原糖、氨基酸和酚类化合物,显著促进 AgNPs 的形成,且所得颗粒尺寸最小。相比之下,乳清和香蕉皮因蛋白质或纤维含量较高,导致颗粒尺寸较大(分别为 91.28 nm 和 68.06 nm),表明底物的化学组成是影响合成效率的关键因素。时间进程实验显示,48 小时为最佳合成时间,此时 AgNPs 浓度达 1.535 mg/L,延长培养时间未进一步提升产率。
3. 细胞毒性评估
通过 MTT 法检测 AgNPs 对 ccl-81 肾上皮细胞的毒性,结果显示其 IC??为 200 μg/mL,表明在较低浓度下对正常细胞毒性较低,具备安全应用潜力。显微镜观察显示,高浓度处理组(1.955 mg/mL)细胞出现皱缩、脱落等形态学改变,而低浓度组(≤0.244 mg/mL)细胞存活率超过 85%,证实了 AgNPs 在感染控制与水处理等领域的应用可行性。
研究结论与讨论
本研究成功建立了一种基于枯草芽孢杆菌和农业废弃物的 AgNPs 绿色合成体系,证实了生物法在降低颗粒尺寸、减少环境污染方面的显著优势。黑糖蜜等废弃物不仅作为碳源支持菌体生长,其含有的生物活性分子还直接参与银离子还原与颗粒稳定,为废弃物资源化提供了双重价值。尽管 XRD 检测到少量副产物,但其细胞毒性结果表明该合成路径具备较高生物安全性,为开发环保型抗菌剂、水净化材料奠定了基础。
研究结果还表明,生物合成 AgNPs 的尺寸与稳定性可通过底物选择精确调控,这一特性在生物医药领域(如靶向给药、抗菌涂层)具有重要应用前景。此外,该方法避免了传统化学合成的有毒副产物,符合循环经济与可持续发展理念,为纳米技术的绿色化转型提供了新范式。未来研究可进一步优化合成条件,拓展至其他金属纳米颗粒的生物合成,并探索其在农业病害防治、食品保鲜等领域的实际应用。