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间变性甲状腺癌（ATC）预后极差，现有治疗手段有限。研究人员通过网络药理学结合体内外实验，探究绞股蓝皂苷 LI（Gyp LI）抗 ATC 机制。发现其通过调控 SRC/PI3K/AKT 轴抑制肿瘤进展，增强碘摄取，为 ATC 治疗提供新方向。
间变性甲状腺癌（Anaplastic Thyroid Cancer, ATC）是甲状腺癌中恶性程度极高的亚型，其癌细胞分化程度低、侵袭性强，早期易发生颈部淋巴结转移，晚期可转移至肺、骨、肝等重要器官。由于 ATC 生长迅速且侵袭性强，早期诊断和治疗困难，目前主要依赖手术、放疗和化疗，但这些方法在延长患者生存方面效果有限，患者死亡率高，因此亟需开发更有效的治疗手段。
为探索新的治疗途径，赣南医学院第一附属医院等机构的研究人员开展了关于绞股蓝皂苷 LI（Gypenoside LI, Gyp LI）抗 ATC 作用机制的研究。该研究通过网络药理学分析结合体内外实验验证，揭示了 Gyp LI 在 ATC 治疗中的潜力，相关成果发表在《BMC Cancer》。
研究主要采用了以下关键技术方法：
- 网络药理学分析：通过 Swiss Target Prediction 等数据库预测 Gyp LI 潜在靶点，从 TTD、OMIM、Gene Cards 获取 ATC 相关靶点，利用 Venny 2.1.0 筛选共同靶点，通过 STRING 构建蛋白质 - 蛋白质相互作用（PPI）网络，借助 Cytoscape 和 CytoHubba 插件识别核心靶点，并通过 DAVID 数据库进行 GO 和 KEGG 通路富集分析。
- 分子对接：从 TCMSP 获取 Gyp LI 的 mol2 结构，从 PDB 数据库获取潜在靶蛋白三维结构，使用 AutoDock Vina 进行分子对接，分析结合能和相互作用模式。
- 体外实验：采用 ATC 细胞系 8305C 和 C643，通过 CCK-8、克隆形成、EdU 实验检测细胞增殖能力；利用划痕愈合、Transwell 实验评估细胞迁移和侵袭能力；通过流式细胞术检测细胞凋亡；运用 qRT-PCR 和 Western blotting 分析基因和蛋白表达水平。
- 体内实验：构建裸鼠异种移植瘤模型，观察 Gyp LI 对肿瘤生长的抑制作用，通过苏木精 - 伊红（HE）染色和免疫组织化学分析肿瘤组织病理变化及蛋白表达。
研究结果
网络药理学预测核心靶点与通路
通过分析，共筛选出 78 个 Gyp LI 与 ATC 的共同靶点。PPI 网络显示，HSP90AA1、SRC、CASP3 等为关键枢纽基因。KEGG 富集分析表明，PI3K/AKT 信号通路在 ATC 治疗中起重要作用，Gyp LI 可能通过调控该通路发挥作用。分子对接结果显示，Gyp LI 与 HSP90AA1、SRC、CASP3 的结合能较低，提示较强的结合能力，且甲状腺癌组织中这三种蛋白表达显著高于正常组织。
Gyp LI 抑制 ATC 细胞增殖、迁移和侵袭
CCK-8 实验显示，Gyp LI 对 8305C 和 C643 细胞的增殖抑制呈浓度依赖性，24 小时半数抑制浓度（IC50）分别为 68.46 μM 和 60 μM。克隆形成和 EdU 实验进一步证实，Gyp LI 能显著减少克隆形成数和 EdU 阳性细胞比例。划痕愈合和 Transwell 实验表明，Gyp LI 可剂量依赖性地抑制细胞迁移和侵袭，降低伤口愈合率和穿膜细胞数。
Gyp LI 诱导 ATC 细胞凋亡
流式细胞术检测发现，Gyp LI 处理后，ATC 细胞早期和晚期凋亡比例显著增加。Western blotting 显示，Gyp LI 上调 cleaved CASP3 和 cleaved CASP9 蛋白表达，下调 HSP90AA1 蛋白水平，表明其通过激活凋亡通路诱导细胞凋亡。
Gyp LI 增强 ATC 细胞对放射性碘的敏感性
qRT-PCR 和 Western blotting 结果显示，Gyp LI 可显著上调钠 - 碘协同转运体（NIS）和促甲状腺激素受体（TSHR）的 mRNA 及蛋白表达，提示其能增强 ATC 细胞对放射性碘的摄取能力，恢复肿瘤细胞对放射性碘治疗的敏感性。
体内实验验证 Gyp LI 的抗肿瘤作用
裸鼠异种移植瘤模型显示，Gyp LI（100 mg/kg）显著抑制肿瘤体积增长和重量增加，且对小鼠肝脏无明显毒性。免疫组织化学和 Western blotting 表明，Gyp LI 下调肿瘤组织中 SRC、P-PI3K、P-AKT 等蛋白表达，上调 NIS 和 CASP3 表达，进一步验证其通过抑制 SRC/PI3K/AKT 通路发挥抗肿瘤作用。
结论与讨论
本研究通过网络药理学和实验验证发现，Gyp LI 通过抑制 SRC/PI3K/AKT 信号通路，抑制 ATC 细胞增殖、迁移和侵袭，诱导细胞凋亡，并通过上调 NIS 表达增强肿瘤细胞对放射性碘的敏感性。这些结果为 ATC 的治疗提供了新的潜在药物和作用机制，提示 Gyp LI 有望成为 ATC 治疗的新选择。
值得注意的是，Gyp LI 作为天然产物，具有多靶点作用优势，可同时调控多个关键通路，可能减少单一靶点药物的耐药性问题。尽管本研究未涉及长期毒性和临床疗效评估，但其体内外实验结果为后续临床研究奠定了基础。未来需进一步开展临床前毒性研究和临床试验，以验证 Gyp LI 的安全性和有效性，推动其向临床应用转化。
