帕金森病患者中对 α- 突触核蛋白反应的细胞毒性 CD4 T 细胞的差异记忆富集

帕金森病（PD）病因复杂，神经炎症作用关键。研究人员针对 PD 患者中对 α- 突触核蛋白（α-syn）反应的 CD4 T 细胞展开研究，发现 PD_R 患者 CD4 效应记忆 T 细胞（TEM）中 CELSR2 表达升高，且 Granulysin+CD4 细胞毒性 TEM细胞减少，为 PD 病理研究提供新方向。

　　

帕金森病（Parkinson’s disease, PD）是一种复杂的神经退行性疾病，全球约有 1000 万患者，且发病率随年龄增长而升高。其核心病理特征是黑质致密部多巴胺能神经元丢失和 α- 突触核蛋白（α-synuclein, α-syn）异常聚集形成的路易小体。除了运动症状如震颤、僵直和姿势不稳外，非运动症状如睡眠障碍、认知功能障碍等可能在确诊前 20 年就已出现。然而，由于 PD 的复杂性和异质性，早期诊断手段有限，治疗方法也仅能缓解症状，无法阻断疾病进展。深入理解 PD 的病理机制，尤其是免疫炎症在其中的作用，成为开发靶向治疗的关键。

在这样的背景下，美国拉霍亚免疫学研究所（La Jolla Institute for Immunology）等机构的研究人员开展了相关研究，旨在揭示对 α-syn 反应的 PD 患者（PD_R）中 T 细胞亚群的异常变化。研究发现，PD_R 患者的 CD4 效应记忆 T 细胞（effector memory T cells, T_EM）中 Cadherin EGF LAG 七 - pass G-type 受体 2（CELSR2）表达显著升高，且细胞毒性 T_EM细胞几乎完全缺失，尤其是 Granulysin⁺CD4 细胞毒性 T_EM细胞数量减少。该研究成果发表在《npj Parkinson's Disease》，为 PD 的免疫病理机制提供了新见解，并为靶向治疗奠定了基础。

研究人员主要采用了以下关键技术方法：

1. 流式细胞术（Flow cytometry）：检测 PD_R 和健康对照（HC_NR）中 CD4 T 细胞表面 CELSR2 的表达，以及 Granulysin⁺等细胞毒性标志物的水平。
2. 单细胞 RNA 测序（Single-cell RNA sequencing, scRNA-seq）：对分选的 CELSR2⁺和 CELSR2^- CD4 T_EM细胞进行转录组分析，鉴定不同细胞亚群的基因表达特征。
3. 样本队列：纳入 PD 患者（分为对 α-syn 反应的 PD_R 和无反应的 PD_NR）和健康对照，通过外周血单个核细胞（PBMC）分析 T 细胞表型和功能。

研究结果

1. CELSR2 在 PD_R 患者 CD4 T_EM细胞中表达升高

通过对 PD_R 和 HC_NR 的 CD4 记忆 T 细胞转录组分析，筛选出 11 个差异表达的膜蛋白基因，其中 CELSR2 在 PD_R 的 CD4 T_EM细胞中蛋白表达显著高于 HC_NR。进一步分析显示，CELSR2 主要富集于效应记忆 T 细胞亚群（T_EM），而非中央记忆 T 细胞（T_CM）或终末分化效应记忆 T 细胞（T_EMRA）。这提示 CELSR2 可能与 PD_R 患者 T 细胞的活化和分化状态相关。

2. 单细胞转录组揭示 PD_R 患者 T_EM细胞亚群分布异常

单细胞 RNA 测序分析显示，PD_R 患者的 CELSR2⁺ CD4 T_EM细胞中，分化型 T_EM细胞（Cluster 1）和活化型 T_EM细胞（Cluster 6）比例显著增加，而细胞毒性 T_EM细胞（Cluster 4，高表达 GZMB、GNLY 等细胞毒性基因）在 PD_R 患者中几乎完全缺失，无论是 CELSR2⁺还是 CELSR2^-亚群，其频率均显著低于 HC_NR。

3. 流式细胞术验证 Granulysin⁺细胞毒性 CD4 T_EM细胞减少

利用流式细胞术检测 Granzyme B、Perforin 和 Granulysin 等细胞毒性标志物，发现 PD_R 患者中 Granulysin⁺ CD4 T_EM细胞频率显著低于 HC_NR，而 CD8 T 细胞中的细胞毒性亚群无明显差异。这表明 PD_R 患者的 CD4 T 细胞毒性功能特异性受损，可能与神经炎症的调控异常相关。

研究结论与讨论

本研究首次发现 CELSR2 在 T 细胞中的表达，并证实其在 PD_R 患者的 CD4 T_EM细胞中富集。结合单细胞转录组和流式细胞术结果，揭示了 PD_R 患者中细胞毒性 CD4 T_EM细胞的特异性缺失，尤其是 Granulysin⁺亚群的减少。这一发现提示，细胞毒性 CD4 T 细胞可能在 PD 的神经炎症和神经元损伤中起保护作用，其缺失可能导致 PD_R 患者的病理进展。

CELSR2 作为一种非典型钙粘蛋白，参与平面细胞极性和胚胎发育，其在 T 细胞中的功能此前未被报道。研究推测，CELSR2 可能通过调控 T 细胞的活化和分化，影响 PD 的免疫病理过程。此外，PD_R 患者中分化型和活化型 T_EM细胞的增加，可能与抗原呈递细胞的相互作用增强有关，进一步加剧神经炎症。

尽管研究存在样本量较小、女性患者比例低等局限性，但其首次明确了 α-syn 反应性 PD 患者中 T 细胞亚群的特异性变化，为 PD 的分型和免疫治疗提供了新靶点。未来研究可进一步验证 CELSR2 在 T 细胞中的功能机制，并探索 Granulysin⁺ CD4 T 细胞在神经保护中的作用，为开发针对 PD_R 患者的个性化免疫疗法奠定基础。