柠檬酸对禾谷镰刀菌 B 型单端孢霉烯族毒素合成的抑制及对其生长和色素合成的促进:转录组和蛋白质组分析

【字体: 时间:2025年05月15日 来源:Applied and Environmental Microbiology 3.9

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  本文聚焦禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum),探究柠檬酸(CA)对其影响。发现 CA 可通过上调碳源代谢相关酶促进菌体生长,通过调控聚酮合成酶改变菌丝色素,同时显著抑制 B 型单端孢霉烯族毒素合成相关 Tri 基因及蛋白表达。

  禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)是全球范围内危害小麦、玉米等作物的重要病原真菌,其引发的赤霉病等不仅导致粮食减产,还会因产生单端孢霉烯族毒素(如脱氧雪腐镰刀菌烯醇 DON 等 B 型毒素)威胁人类健康。本研究针对植物根系分泌物及重金属螯合剂柠檬酸(CA)对该菌的影响展开多组学分析。
在不同浓度 CA(2.5-20 mM)处理下,禾谷镰刀菌呈现出剂量依赖性的生长和形态变化。低浓度组(2.5、5 mM)与对照组(CK)的 RNA 和蛋白表达模式相似,而 10、20 mM 组表现出更显著的差异。菌丝在 CA 处理后生长更为旺盛,气生菌丝和基内菌丝发育增强,且随着 CA 浓度升高,菌丝颜色从金黄逐渐变为酒红,这与聚酮合成酶基因(如AurFAurJAurT等)的表达上调相关,这些酶参与了金赤霉素和红赤霉素等色素的合成。值得注意的是,10、20 mM 组中负责将红赤霉素转化为金赤霉素的 AurT 蛋白表达下调,可能导致红赤霉素比例升高,与菌丝颜色变化一致。

转录组和蛋白质组联合分析表明,CA 通过上调碳源代谢关键酶基因促进菌体生长。磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK,pckA)在无葡萄糖条件下通过糖异生途径为菌体提供碳源,甘油激酶(Glpk,glpk)参与甘油代谢,亚油酸异构酶(LAI12,LAI12)则通过转化亚油酸促进菌丝生长,这些酶的表达水平均随 CA 浓度升高而显著增加。

然而,CA 对 B 型单端孢霉烯族毒素的合成具有显著抑制作用。核心合成基因簇中的Tri5(编码 Trichodiene 合酶)、Tri4(细胞色素 P450 氧化酶)、Tri101(C-3 乙酰转移酶)等基因及其蛋白表达均被下调,涉及毒素合成、调控和外排的多个环节。例如,转录因子Tri6Tri10的表达降低可能抑制了毒素合成基因的转录,而毒素外排蛋白 Tri12 的减少则可能影响毒素的转运。此外,pH 响应转录因子PacC在高浓度 CA 处理下表达上调,可能通过抑制培养基酸化和调控毒素合成基因来发挥作用,但相关蛋白未被检测到,需进一步验证。

高效液相色谱(HPLC)检测显示,CA 处理后 DON 产量呈剂量依赖性下降,10 mM CA 可显著降低 15 - 乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-ADON)的合成,但 5 mM CA 处理时其产量略有升高,提示不同浓度 CA 可能通过复杂机制影响毒素代谢。

本研究揭示了 CA 对禾谷镰刀菌的双重作用:一方面通过促进碳源代谢加速菌体生长和色素合成,另一方面通过抑制 Tri 基因表达阻断 B 型毒素合成。这为理解植物 - 土壤 - 真菌互作机制提供了新视角,也为农业生产中合理利用 CA 调控病原菌、降低毒素污染风险奠定了理论基础,但需注意 CA 可能促进菌体增殖的潜在风险。

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