细菌纤维素高产菌株筛选及与酵母共培养体系构建:基于酿造工业废弃物的低成本生产策略

【字体: 时间:2025年05月15日 来源:Carbohydrate Polymer Technologies and Applications 6.2

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  为解决细菌纤维素(BC)生产成本高、产量低的问题,研究人员以木葡糖酸醋杆菌(Komagataeibacter xylinus)MS2530 为对象,探究与酵母共培养及酿造废弃物(BSY)培养基的应用。结果表明共培养显著提升 BC 产量,BSY 可替代传统 HS 培养基降低成本,为工业化生产提供新路径。

  
细菌纤维素(Bacterial Cellulose, BC)作为一种具有高纯度、高强度和优良生物相容性的天然高分子材料,在食品、医药、电子和纺织等领域展现出广阔应用前景。然而,其工业化生产面临两大核心挑战:一是传统培养基(如 Hestrin-Schramm 培养基,HS)依赖葡萄糖等高价原料,导致生产成本占比高达 30%-65%;二是发酵周期长、产量低,制约规模化应用。此外,酿造、食品等工业每年产生大量有机废弃物,如啤酒酵母残渣(BSY),其处理不仅增加环境负担,还造成资源浪费。如何通过微生物代谢优化和废弃物资源化利用突破 BC 生产的成本与效率瓶颈,成为当前生命科学与生物制造领域的研究热点。

为攻克上述难题,亚美尼亚国家科学院下属研究机构的科研团队开展了系统性研究。他们以化学诱变获得的木葡糖酸醋杆菌(Komagataeibacter xylinus)MS2530 为核心菌株,结合酵母共培养策略与酿造废弃物培养基替代技术,探索低成本、高效率的 BC 生产新路径。相关成果发表于《Carbohydrate Polymer Technologies and Applications》,为工业生物合成领域提供了重要参考。

研究采用的关键技术方法包括:

  1. 共培养体系构建:将K. xylinus MS2530 与克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)、发酵毕赤酵母(Pichia fermentans)等 6 种酵母菌株以 1:1 比例混合接种,通过静态发酵比较单培养与共培养的 BC 产量差异。
  2. 废弃物培养基应用:以啤酒酵母残渣离心 supernatant(未灭菌)作为 BSY 培养基,与传统 HS 培养基对比,分析其对 BC 合成的影响。
  3. 结构与性能表征:利用扫描电子显微镜(SEM)观察 BC 膜微观结构,傅里叶变换红外光谱(FTIR)分析化学官能团,同时测定水 Holding Capacity(WHC)、拉伸强度等物理机械性能。

3.1 发酵条件优化与产量影响因素


通过单因素实验确定最优发酵参数为:30℃、pH 5.5、接种量 10%、发酵时间 7 天。在此条件下,HS 培养基中 BC 产量达 12.6 g/L。研究发现,pH 和温度通过影响菌株代谢活性显著改变产量,而接种量过高会导致营养竞争抑制纤维素合成。

3.2 酿造废弃物培养基的可行性验证


BSY 培养基无需灭菌即可支持K. xylinus MS2530 生长,第 7 天形成 7 mm 厚 BC 膜,较 HS 培养基(4 mm)显著增厚。BSY 的低成本优势显著(HS 培养基成本 5.52 美元 / L vs BSY 0.13 美元 / L),且其富含蛋白质、B 族维生素和碳源(干重 45%-47%),为菌株提供复合营养。

3.3 共培养策略对 BC 产量的提升


K. marxianus MDC 10081 共培养时,HS 和 BSY 培养基中 BC 产量分别提升至 20.9 g/L 和 26.4 g/L,较单培养提高 67% 和 101%。酵母代谢产物可能通过提供生长因子或改善微环境促进纤维素合成,而 Candida 属酵母因代谢抑制作用效果不佳。

3.4 BC 膜的结构与性能分析


SEM 显示,BSY 培养基中 BC 纤维直径从 HS 的 42 nm 减小至 38 nm,结构更致密;与P. pastoris共培养时,BSY 培养基 BC 膜孔隙率显著增加,可能赋予其在生物医药领域的独特应用价值。FTIR 证实,不同条件下合成的 BC 均具有典型纤维素官能团(如 3336 cm?1 处的 - OH 伸缩振动),化学结构一致。

3.5 物理机械性能评估


湿态 BC 膜表现出高达 99.9% 的水 Holding Capacity,干态膜拉伸强度为 0.10 MPa,杨氏模量 45.70 MPa,性能与文献报道一致,表明共培养和废弃物培养基未影响 BC 的基本应用特性。

4. 结论与意义


本研究通过微生物代谢工程与废弃物资源化的双重创新,成功建立低成本 BC 生产体系:利用K. xylinus MS2530 与K. marxianus的共培养体系,结合未灭菌 BSY 培养基,实现 BC 产量显著提升(最高 26.4 g/L)和成本降低(减少 97% 培养基费用)。该策略不仅突破了传统 BC 生产的成本瓶颈,还为酿造工业废弃物的环境友好型处理提供了新方向,符合循环经济与绿色制造理念。未来可进一步探索共培养机制及 BC 膜的功能化修饰,推动其在高端医疗敷料、柔性电子材料等领域的实际应用。

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