编辑推荐：
为探究三氯乙烯（TCE）诱导免疫性肾损伤机制，研究人员围绕补体因子 H（CFH）/ 血清淀粉样蛋白 A（SAA1）信号展开研究。发现 TNFα 与 IFNγ 通过调控 CFH 影响肾血管内皮屏障，CFH 缺乏通过 SAA1/TLR2 通路引发炎症，为相关疾病治疗提供新方向。
在工业生产的大舞台上，三氯乙烯（TCE）作为一种常用的氯代有机物，广泛参与着各类生产环节。然而，它却如同隐藏在幕后的 “危险分子”，悄然威胁着接触人群的健康。长期接触 TCE 的工人可能会患上三氯乙烯诱导超敏综合征（TIHS），其中，肾脏损伤与 TIHS 患者的病程和预后紧密相连，就像一对难解难分的 “双胞胎”。但目前，对于 TIHS 肾损伤机制的研究却如同迷雾笼罩的森林，让人难以看清方向，这也导致临床治疗手段有限，长期使用糖皮质激素治疗带来的不良反应，更是给患者的身心都压上了沉重的负担。在这样的困境下，深入探索 TIHS 肾损伤的内在机制，寻找新的治疗靶点，就成为了医学领域亟待攻克的难题。
为了拨开这层迷雾，安徽医科大学的研究人员开展了一项极具价值的研究，相关成果发表在《Ecotoxicology and Environmental Safety》上。他们聚焦于补体因子 H（CFH）/ 血清淀粉样蛋白 A（SAA1）信号通路，通过体内外实验相结合的方式，揭开了 TCE 诱导免疫性肾损伤的部分神秘面纱，为该领域的研究和临床治疗带来了新的曙光。
研究人员主要采用了以下关键技术方法：构建 TCE 致敏小鼠模型，通过蛋白组学分析筛选差异蛋白，运用 ELISA 检测血清及细胞培养上清中细胞因子（如 TNFα、IFNγ、CFH、SAA1 等）和肾功能指标（如 Cre、BUN 等），利用免疫荧光、免疫组化观察蛋白表达定位，借助流式细胞术检测循环内皮细胞（CECs），通过 Western blot、Co-IP 验证蛋白间相互作用，进行细胞转染（CFH siRNA、SAA1 siRNA 及过表达质粒）及 Transwell 实验检测内皮屏障功能等。
3.1 中和血清 TNFα 和 IFNγ 减轻 TCE 诱导的肾损伤
通过给小鼠尾静脉注射 TNFα 和 IFNγ 中和抗体，发现不仅血清中这两种细胞因子水平显著降低，小鼠的肾功能指标（Cre、BUN、Cys-c、α1-MG、β2-MG）也明显改善，肾脏组织的 HE 和 PAS 染色显示病理损伤减轻。这表明 TNFα 和 IFNγ 在 TCE 诱导的肾损伤中扮演着重要角色，中和它们能有效缓解肾损伤。
3.2 中和血清 TNFα 和 IFNγ 减轻 TCE 诱导的内皮细胞损伤
透射电镜观察显示，TCE 致敏阳性小鼠的肾小球和肾小管周围内皮细胞膜破裂、细胞质丢失，而中和抗体处理后细胞损伤明显减轻。流式细胞术检测发现，TCE 致敏阳性小鼠的 CECs 数量显著增加，中和抗体处理后则减少。此外，尿液中 ET-1、VCAM-1 水平及肾脏中 ICAM-1、VCAM-1 表达在 TCE 致敏阳性小鼠中升高，而内皮细胞连接蛋白（VE-cadherin、occludin）和糖萼蛋白（glypican-1、syndecan-1）表达降低，中和抗体处理逆转了这些变化。这说明 TNFα 和 IFNγ 通过损伤肾血管内皮细胞，破坏内皮屏障功能，进而引发肾损伤。
3.3 TNFα 联合 IFNγ 调节肾血管内皮细胞中 CFH 的表达
蛋白组学分析显示，TCE 致敏阳性小鼠肾脏中补体和凝血级联通路富集，CFH 主要表达于肾血管内皮细胞，且 TCE 致敏导致其细胞内表达减少、细胞外分泌增加，中和 TNFα 和 IFNγ 可恢复细胞内 CFH 表达。体外实验也证实，TNFα 联合 IFNγ 处理人肾肾小球内皮细胞（HRGECs）可抑制 CFH 细胞内表达，促进其分泌。这表明 TNFα 和 IFNγ 通过调控 CFH 的表达和分泌，影响肾血管内皮细胞功能。
3.4 CFH 对维持内皮屏障功能至关重要
通过 CFH siRNA 和过表达质粒转染 HRGECs，发现抑制 CFH 表达会导致内皮细胞黏附分子（ICAM-1、VCAM-1）表达增加，糖萼蛋白和细胞连接蛋白表达减少，中性粒细胞（PMN）黏附率升高，跨内皮电阻（TEER）值降低，内皮屏障功能受损；而过表达 CFH 则起到相反的保护作用。这明确了 CFH 在维持肾血管内皮屏障功能中的关键作用。
3.5 CFH 调节 SAA1 的表达
GO 分析显示补体激活和急性期反应是关键通路，体外实验表明，TNFα 联合 IFNγ 可诱导 HRGECs 中 SAA1 表达，而 CFH 可负调控 SAA1 的表达和分泌。这揭示了 CFH 通过调控 SAA1 参与 TCE 诱导的肾损伤机制。
3.6 TCE 致敏小鼠肾脏中 SAA1 及其下游信号通路的表达
免疫组化显示 SAA1 主要表达于 TCE 致敏小鼠肾脏的血管内皮细胞和近端小管上皮细胞，血清 SAA1 水平升高，且 SAA1 与 TLR2 结合，激活 NF-κB 信号通路（NF-κB p-p65 表达增加）。这表明 SAA1/TLR2/NF-κB 通路在 TCE 诱导的肾损伤炎症反应中起重要作用。
3.7 SAA1 参与 TCE 诱导的免疫性肾损伤
通过腹腔注射 SAA1 抑制剂 SGA360，发现可改善 TCE 致敏小鼠的肾功能，减轻肾脏病理损伤。体外实验显示，敲低 SAA1 基因可减少 HRGECs 中黏附分子表达，抑制 NF-κB 信号通路激活，降低 PMN 黏附率。这证实了 SAA1 在 TCE 诱导肾损伤中的关键作用，抑制 SAA1 可缓解肾损伤。
综上所述，该研究揭示了在 TCE 诱导的免疫性肾损伤中，TNFα 和 IFNγ 联合作用可下调肾血管内皮细胞内 CFH 表达，促进其分泌，CFH 细胞内缺乏会导致 SAA1 表达升高，SAA1 通过与 TLR2 结合激活 NF-κB 信号通路，引发炎症反应，同时破坏内皮屏障功能，最终导致肾损伤。这一研究不仅阐明了 TCE 诱导肾损伤的新机制，还为 TIHS 等相关疾病的治疗提供了潜在靶点，如调控 CFH/SAA1/TLR2/NF-κB 信号通路，为临床开发新的治疗策略奠定了基础，有望为患者带来更有效的治疗选择，减轻病痛负担。
