新型 ellipticine 衍生物 SMU-14a 通过抑制 TLR3/NF-κB/MAPK/IRF3 通路治疗急性肝炎的机制研究

本研究针对急性肝炎治疗中 Toll 样受体 3（TLR3）靶向抑制剂稀缺的现状，通过高通量筛选发现天然产物 ellipticine 具有 TLR3 抑制活性（IC50 = 5.66 ± 1.03 μM），进而设计合成 31 种衍生物，获得最优化合物 SMU-14a（IC50 = 0.18 ± 0.02 μM）。该化合物通过阻断 NF-κB、MAPK 和 IRF3 信号通路，显著降低 IL-6、TNF-α 等炎症因子水平，并在小鼠模型中验证其降低 ALT/AST 的肝保护作用，为 TLR3 靶向药物开发提供新策略。

　　

肝脏炎症性疾病是全球健康重大负担，其中 Toll 样受体 3（TLR3）作为识别病毒双链 RNA 的关键模式识别受体，其过度激活会通过 NF-κB、MAPK 和 IRF3 信号通路引发炎症风暴，加剧肝损伤。然而现有 TLR3 抑制剂如 CU-CPT 4a 存在活性不足（IC₅₀ >1 μM）、结构不稳定等问题，临床转化困难。天然产物因其结构多样性和低毒性成为药物开发热点，但针对 TLR3 的天然来源抑制剂仍属空白。

南方医科大学研究团队通过高通量筛选 850 种天然产物，首次发现抗肿瘤生物碱 ellipticine 具有 TLR3 抑制活性。研究人员通过结构优化获得强效衍生物 SMU-14a，在 HEK-blue hTLR3 细胞中 IC₅₀ 达 0.18 ± 0.02 μM，较母体化合物活性提升 30 倍。机制研究表明，SMU-14a 能特异性抑制 Poly I:C 诱导的 p65、ERK 和 TBK1 磷酸化，阻断下游炎症因子 IL-6 和 TNF-α 的产生。在刀豆蛋白 A 诱导的急性肝炎小鼠模型中，SMU-14a 治疗组血清 ALT/AST 水平显著降低，肝脏病理损伤明显改善。该成果发表于《European Journal of Medicinal Chemistry》，为开发新型 TLR3 靶向抗肝炎药物奠定基础。

研究采用 HEK-blue hTLR3 报告基因系统进行活性评价，通过 ELISA 检测小鼠腹腔巨噬细胞和 RAW264.7 细胞的 IL-6 分泌水平，Western blot 分析信号通路蛋白磷酸化状态，并建立刀豆蛋白 A 诱导的小鼠急性肝炎模型评估体内药效。人外周血单个核细胞（PBMCs）用于验证化合物对 TNF-α 的调控作用。

筛选潜在 ellipticine 衍生 TLR3 抑制剂
通过 NO 信号检测筛选发现 ellipticine 在 10 μM 时可抑制 Poly I:C 诱导的 RAW264.7 细胞炎症反应，初步 SAR 分析表明 C9 位甲氧基修饰对活性至关重要。

结论
SMU-14a 通过空间位阻效应增强与 TLR3 结合，其抑制 TLR3-TRIF 通路的效果优于已知抑制剂 M199。该化合物同时具备抗病毒和抗炎双重潜力，且细胞毒性低于母体 ellipticine（CC₅₀ >50 μM）。

化学合成
所有衍生物经 ¹H/¹³C NMR 和 HRMS 表征，关键中间体 5-硝基吡啶-2-羧酸通过钯碳催化氢化还原获得。

这项研究不仅填补了 TLR3 天然抑制剂领域的空白，更创新性地将抗肿瘤骨架 ellipticine 转化为抗炎先导化合物。SMU-14a 的多通路协同抑制作用为复杂性肝炎治疗提供新思路，其低细胞毒性特征显示出良好的临床转化前景。该团队提出的"空间位阻增效"策略为其他 PRRs 抑制剂设计提供了普适性参考。