高温大曲中可培养未测序（CBNS）真菌的鉴定及功能评价：改进真菌收集方法的研究

为全面解析高温大曲（茅台香型白酒生产关键固态发酵过程）真菌多样性及风味形成潜力，研究人员整合培养依赖与非依赖技术开展研究。通过迭代培养分离 660 株真核菌落（33 属 58 种），提升培养效率至 63.2%，并发现 21 属 27 种可培养但未被高通量测序检测的真菌，其中马克斯克鲁维酵母（Kluyveromyces marxianus）在 45℃产乙酸乙酯能力突出，凸显培养法重要性。

　　

新一代测序技术显著提升了我们对发酵食品中微生物多样性及生态功能的认知，但基于培养的方法对于全面理解这些复杂生态系统仍不可或缺。本研究结合培养依赖与非培养依赖技术，旨在阐明高温大曲（茅台香型白酒生产中关键的固态发酵过程）中真菌的微生物多样性及风味形成潜力。通过迭代培养策略，研究人员从大曲样品中成功分离并鉴定出 660 个纯真核菌落，代表 33 个属和 58 个种，该方法使培养效率从 20.7% 显著提升至 63.2%。此外，尽管优化了 ITS（内转录间隔区）rRNA 引物组以增强真核微生物的检测，仍鉴定出 21 个属（包含 27 个种）可培养但未被高通量测序分析检测到的真菌。发酵实验表明，这些真菌物种具有强劲的生长能力和显著的乙酸乙酯生产潜力，尤其是马克斯克鲁维酵母（Kluyveromyces marxianus），其在高温（45℃）下表现出优异的性能。本研究改进了培养依赖技术以提高从大曲中分离真核微生物的效率，这些发现突显了基于培养的方法在表征微生物多样性和功能方面的重要性。