荧光酪胺信号放大系统 FT-GO 多重免疫荧光染色实验方案

免疫荧光染色中，酪胺信号放大（TSA）因过氧化物酶（POD）催化活性易被淬灭，多重染色应用受限。研究人员建立小鼠脑切片多重免疫荧光染色新方案，采用荧光酪胺 - 葡萄糖氧化酶（FT-GO）系统，实现三重染色，为相关研究提供新工具。

　　

酪胺信号放大（TSA）是组织化学分析中高灵敏度的酶促方法，但其在多重染色中的应用受限于过氧化物酶（POD）催化活性的淬灭。本文提供一种使用荧光酪胺 - 葡萄糖氧化酶（FT-GO）荧光 TSA 系统对小鼠脑切片进行多重免疫荧光（IF）染色的详细方案。FT-GO 利用葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖产生的过氧化氢，将荧光素（FT）共价沉积到组织切片上。对于 TSA 系统的多重标记，使用叠氮化钠使抗体偶联的 POD 失活。文中描述了组织切片制备、三重 FT-GO IF 染色和共聚焦激光扫描显微镜观察。有关该方案的使用和执行的完整细节，请参考 Yamauchi 等人（2022）的研究。