附子通过调控肠道菌群及胆汁酸代谢改善寒证类风湿性关节炎的机制研究

本研究针对寒证类风湿性关节炎（RA）的治疗难题，通过多组学技术揭示了传统中药附子（Fuzi）通过重塑肠道菌群（如Lachnospiraceae和Ruminococcaceae）、调节胆汁酸代谢（如THDCA和TCA），并激活TGR5-cAMP-PKA信号通路抑制NLRP3炎症小体，显著改善关节炎症和骨破坏。该研究为中医药现代化提供了分子机制支持，发表于《Chinese Medicine》。

　　

类风湿性关节炎（RA）是一种全球高发的慢性自身免疫性疾病，以关节滑膜炎症和骨破坏为特征，其中寒证型RA在中医理论中与寒冷环境密切相关。尽管现代药物如甲氨蝶呤（MTX）可缓解症状，但长期使用存在副作用和耐药性问题。附子（Fuzi）作为典型热性中药，临床用于寒证RA疗效显著，但其作用机制尚未明确。成都中医药大学的研究团队通过整合微CT、肠道菌群移植（FMT）和靶向胆汁酸代谢组学等技术，揭示了附子通过“菌群-胆汁酸-免疫”轴治疗寒证RA的创新机制，成果发表于《Chinese Medicine》。

研究采用胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠模型结合冷暴露模拟寒证RA，通过关节炎评分、骨微结构分析和炎症因子检测证实附子可显著改善关节肿胀和骨破坏。16S rRNA测序显示附子特异性富集Lachnospiraceae和Ruminococcaceae等抗炎菌群，FMT实验进一步验证菌群重构是药效关键。靶向代谢组学发现附子显著提升次级胆汁酸taurohyodeoxycholic acid（THDCA）水平，体外实验证明THDCA通过抑制RAW264.7细胞中NO、iNOS及IL-1β等炎症因子释放发挥抗炎作用。Western blot揭示附子激活胆汁酸受体TGR5，下调cAMP-PKA信号和NLRP3炎症小体（含ASC、caspase-1等组分），从而缓解关节炎。

主要技术方法包括：1）建立CIA大鼠模型结合5±2°C冷暴露模拟寒证RA；2）微CT量化骨参数（BV/TV、Tb.Sp等）；3）16S rRNA测序分析肠道菌群；4）UPLC-MS/MS检测粪便和血清胆汁酸；5）LPS诱导RAW264.7细胞炎症模型评估THDCA抗炎活性；6）Western blot检测TGR5-cAMP-PKA-NLRP3通路蛋白表达。

研究结果分为四部分：1）药效验证：附子显著降低寒证RA大鼠关节炎指数（p<0.01），改善骨小梁结构（BMD提升23.7%）和血清TNF-α水平（下降42%）；2）菌群机制：附子使Lachnospiraceae相对丰度增加2.1倍，FMT实验证实菌群移植可传递药效；3）代谢调控：THDCA在附子组粪便中含量升高3.8倍，且体外10μM THDCA即可抑制LPS诱导的IL-6分泌（下降51%）；4）信号通路：附子上调TGR5表达1.9倍，同时降低NLRP3和IL-1β p17蛋白水平。

结论表明，附子通过三重机制治疗寒证RA：1）重构肠道菌群生态；2）促进微生物转化THDCA；3）激活TGR5-cAMP-PKA通路抑制NLRP3炎症小体。该研究首次将中医“寒证”理论与菌群-胆汁酸代谢网络关联，不仅为附子临床应用提供科学依据，也为开发THDCA衍生药物或菌群干预策略开辟新方向。讨论部分指出，冷环境通过降低THDCA加剧RA的发现，为环境温度-菌群-疾病互作研究提供了范例，而甲状腺激素（T3/T4）与能量代谢的关联提示附子“温阳”功效的潜在分子基础。研究局限性包括未使用无菌动物验证菌群因果性，未来需进一步明确特定菌株的胆汁酸转化功能及THDCA与能量代谢的调控细节。