编辑推荐：
子宫内膜癌（EC）治疗面临挑战，尤其复发 / 转移病例对传统疗法响应有限。研究聚焦细胞外基质（ECM）硬度，发现 EC 组织 ECM 硬度显著高于正常内膜，通过 ROCK1/YAP1 轴驱动肿瘤进展。抑制 ROCK1 可增强放化疗及免疫治疗效果，为 EC 治疗提供新策略。
子宫内膜癌（EC）作为全球女性常见妇科恶性肿瘤，其晚期或复发病例因对传统化疗、放疗响应不佳，临床预后极差，5 年总生存率仅 15%–18%。当前针对 EC 的新型治疗手段开发进展缓慢，亟需深入探索肿瘤微环境（TME）中关键调控机制。细胞外基质（ECM）作为肿瘤微环境的重要组成部分，其机械特性如硬度的改变与肿瘤进展密切相关。越来越多证据表明，ECM 硬度升高可通过调控细胞行为促进肿瘤增殖、侵袭和转移，但 ECM 硬度在子宫内膜癌中的具体作用及分子机制尚未明确。
为揭示 ECM 硬度与子宫内膜癌进展的关联，山东大学齐鲁医院（山东省妇科肿瘤重点实验室）的研究团队开展了系列研究。团队发现，ECM 硬度通过激活 ROCK1/YAP1 信号轴驱动子宫内膜癌恶性进展，且靶向该轴可显著增强肿瘤对放化疗、激素治疗及免疫治疗的敏感性。相关成果发表于《Cell Death and Disease》，为 EC 精准治疗提供了新方向。
研究主要采用以下关键技术方法：
- 临床样本与生物信息学分析：收集 90 例子宫内膜样腺癌及 26 例正常子宫内膜样本，结合 TCGA 数据库分析 ROCK1 表达与临床预后的关联；
- 机械特性检测：利用原子力显微镜（AFM）量化 ECM 弹性模量，结合 Movat-Russell 五铬染色分析基质成分；
- 体外模型构建：通过聚丙烯酰胺（PA）凝胶模拟不同硬度 ECM 微环境，分析细胞形态、增殖、凋亡及信号通路变化；
- 分子机制验证：运用 RNA 干扰、慢病毒转染、免疫共沉淀（Co-IP）及 Western blotting 等技术，探究 ROCK1 与 YAP1 的相互作用及下游效应；
- 体内实验：建立裸鼠异种移植模型，评估 ROCK1 抑制剂 Y-27632 与孕激素联合治疗的抗肿瘤效果。
研究结果
1. EC 组织 ECM 硬度升高与 ROCK1 表达正相关
AFM 检测显示，EC 组织的 ECM 弹性模量显著高于正常子宫内膜，且胶原等基质成分沉积增加。生物信息学分析发现，ROCK1 表达与机械刺激相关基因集在 EC 中呈强正相关（R=0.84），免疫组化（IHC）证实 EC 患者肿瘤组织中 ROCK1 蛋白水平显著上调，且高表达患者预后更差（P=0.048）。
2. 硬基质通过 ROCK1 促进 EC 恶性表型
在 3 kPa（软）和 30 kPa（硬）PA 凝胶上培养 EC 细胞，发现硬基质诱导细胞形态伸展、F - 肌动蛋白骨架重组，促进增殖（CyclinD1/CDK4 上调）、抑制凋亡（Cleaved-PARP 下调），并增强侵袭迁移能力。敲低 ROCK1 可逆转硬基质诱导的恶性表型，而过表达 ROCK1 则在软基质中模拟硬基质效应，提示 ROCK1 是 ECM 硬度调控的关键分子。
3. ROCK1 通过磷酸化 YAP1 驱动 EC 进展
Co-IP 证实 ROCK1 与 YAP1 直接结合，硬基质降低 YAP1 磷酸化水平，促进其核转位及转录活性。敲低 YAP1 可部分逆转 ROCK1 过表达诱导的细胞增殖加速和凋亡抵抗，表明 ROCK1 通过激活 YAP1 介导 EC 恶性进展。
4. 抑制 ROCK1 增强治疗敏感性
ROCK1 抑制剂 Y-27632 可剂量依赖性抑制 EC 细胞增殖，诱导 G2 期阻滞和凋亡，同时破坏肌动蛋白骨架。机制上，Y-27632 抑制 ROCK1 下游分子 cofilin1 磷酸化，增强放疗诱导的 DNA 损伤（γH2AX 表达增加），并提高化疗药物（顺铂、紫杉醇等）敏感性（IC50 降低）。此外，Y-27632 可恢复激素抵抗型 EC 细胞对孕激素（MPA）的敏感性，联合用药在裸鼠模型中显著抑制肿瘤生长。
5. ROCK1 调控免疫微环境
高 ROCK1 表达与肿瘤纯度升高、免疫细胞浸润减少相关。Y-27632 可促进 M1 型巨噬细胞极化，增强其对肿瘤细胞的吞噬能力，提示 ROCK1 抑制可重塑免疫微环境，增强抗肿瘤免疫应答。
结论与讨论
本研究首次系统揭示 ECM 硬度通过 ROCK1/YAP1 轴驱动子宫内膜癌进展的分子机制，证实 ROCK1 既是预后标志物，也是潜在治疗靶点。靶向 ROCK1 不仅可逆转肿瘤对放化疗、激素治疗的抵抗，还能通过增强免疫细胞浸润提升免疫治疗效果。值得注意的是，Y-27632 与孕激素联合应用在临床前模型中展现出协同抗肿瘤效应，为激素抵抗型 EC 患者提供了新治疗策略。
研究成果拓展了 EC 机械生物学领域的认知，填补了 ROCK1 在 EC 中作用机制的空白，并为开发基于 ROCK1 抑制的联合疗法提供了实验依据。未来需进一步开展临床转化研究，优化 ROCK1 抑制剂的肿瘤靶向性及安全性，推动其在 EC 个性化治疗中的应用。
