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为探讨银屑病中 LCN2 与 TWEAK/Fn14 通路的关联，研究人员分析三者表达及互作。发现 LCN2 与 Fn14 结合，协同 TWEAK 激活 MAPK 通路，促进炎症因子表达。揭示其协同机制，为银屑病治疗提供新方向。
银屑病是一种困扰全球超 6000 万人的慢性炎症性皮肤病，其核心问题在于角质形成细胞异常增殖、炎症细胞浸润及细胞间复杂互作机制不明。尽管已知 Lipocalin 2（LCN2）和 TWEAK/Fn14 信号通路在银屑病中对表皮发育、炎症细胞趋化和炎症因子释放至关重要，但两者的具体协同机制一直模糊不清。为解开这一谜团，西安交通大学第二附属医院等机构的研究人员开展了深入研究，相关成果发表在《Cellular & Molecular Immunology》。该研究首次系统揭示了 LCN2 与 TWEAK 通过 Fn14 受体协同驱动银屑病进展的分子机制，为靶向治疗提供了关键理论依据。
研究主要采用了以下关键技术方法：收集银屑病患者（n=7 皮肤样本、n=12 血液样本）和健康对照（n=4 皮肤、n=10 血清）的临床样本；构建 imiquimod（IMQ）诱导的银屑病小鼠模型，并使用 Lcn2-/-和 Fn14-/-基因敲除小鼠；运用表面等离子体共振（SPR）、免疫共沉淀（Co-IP）、免疫荧光、多重免疫组化（mIHC）等技术验证蛋白互作与细胞定位；通过 RNA 测序（RNA-seq）分析基因表达谱变化；利用 ELISA、Western blotting 等检测炎症因子和信号蛋白水平。
LCN2 与 TWEAK、Fn14 表达呈正相关
通过对银屑病患者皮损和 IMQ 小鼠模型的分析发现，TWEAK、LCN2 和 Fn14 在病变皮肤中显著高表达，且 LCN2 与 TWEAK、Fn14 的表达水平呈正相关。RNA-seq 显示，IMQ 处理后小鼠皮肤中炎症相关基因（Lcn2、Il6、Tnfrsf12a）、角质形成细胞增殖标记（Krt5、Krt6）及分化标记（Krt1、Krt10）均显著上调。在 Lcn2-/-小鼠中，Fn14 和 TWEAK 蛋白水平显著降低，提示 LCN2 可能调控两者表达。
LCN2 与 Fn14 直接结合并促进巨噬细胞分化
SPR 和 Co-IP 实验证实，LCN2 与 Fn14 存在直接结合（KD=2.43×10-7M），免疫荧光显示两者在角质形成细胞膜上共定位。体外实验表明，LCN2 刺激巨噬细胞系 J774A.1 后，M1 型巨噬细胞标记（inos）和 TWEAK 分泌显著增加，同时激活 NF-κB 和 TRAF2 信号蛋白，提示 LCN2 通过促进 M1 极化和 TWEAK 释放加剧炎症。
LCN2 激活角质形成细胞中 TWEAK/Fn14-MAPK 通路
在角质形成细胞中，LCN2 以剂量和时间依赖方式上调 TWEAK 和 Fn14 表达，并激活 ERK1/2、JNK、p38 等 MAPK 通路成员。当与 M5 细胞因子（含 TNF-α、IL-17A 等）共刺激时，LCN2 与 TWEAK 协同增强炎症因子（IL23A、CXCL10）和基质金属蛋白酶（MMP9）的表达，进一步证实两者的协同促炎作用。
TWEAK 通过中性粒细胞上调 LCN2 表达
TWEAK 刺激可显著增加小鼠皮肤和中性粒细胞中 LCN2 的 mRNA 和蛋白水平，免疫组化显示 TWEAK 促进中性粒细胞浸润和 LCN2 释放。但在角质形成细胞中，TWEAK 单独或联合 M5 细胞因子均无法诱导 LCN2 表达，提示 TWEAK 对 LCN2 的调控具有细胞类型特异性，主要通过中性粒细胞实现。
Fn14 缺失阻断 LCN2/TWEAK 协同效应
在 Fn14-/-小鼠中，IMQ 诱导的角质形成细胞增殖标记（KRT5、KRT14）和 MAPK 通路活化显著减弱，LCN2 刺激也无法上调炎症因子。这表明 Fn14 是 LCN2/TWEAK 协同作用的关键受体，其缺失可阻断两者对银屑病样病变的促进作用。
研究结论与意义
本研究阐明了 LCN2 与 TWEAK 通过 Fn14 受体形成正反馈环路的分子机制：LCN2 由中性粒细胞和角质形成细胞分泌，结合 Fn14 后促进角质形成细胞增殖及 M1 巨噬细胞分化，进而释放 TWEAK；TWEAK 又通过中性粒细胞上调 LCN2，形成 “LCN2-TWEAK-Fn14” 协同促炎网络。该发现不仅揭示了银屑病中细胞间互作的新机制，还为开发靶向 LCN2、TWEAK 或 Fn14 的生物疗法提供了理论依据，有望突破现有治疗局限，为临床精准干预提供新方向。研究中使用的基因敲除动物模型和多组学技术，也为类似炎症性疾病的机制研究提供了方法论参考。
