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针对非洲锥虫病（ sleeping sickness ）治疗药物存在耐药性与毒性等问题，研究人员对迷迭香根系内生真菌（ Cladosporium spp.、Alternaria spp.、Talaromyces spp. ）开展代谢组学及抗锥虫活性研究。发现其提取物具显著抑制作用（ IC?? 1.3 - 3.5 μg/mL ），为抗锥虫药物研发提供新方向。
非洲锥虫病，又称昏睡病，是由布氏锥虫（ T. brucei ）引发的致命性热带疾病，威胁着撒哈拉以南非洲超 6500 万人的生命。当前治疗药物存在疗效不足、易产生耐药性以及毒性较大等问题，因此，开发新型、安全且有效的抗锥虫药物迫在眉睫。植物内生真菌作为一类特殊的微生物，能够产生结构多样的次生代谢产物，在抗肿瘤、抗菌、抗寄生虫等领域展现出巨大潜力。迷迭香（ Rosmarinus officinalis ）作为一种具有丰富生物活性的植物，其根系内生真菌可能蕴含独特的抗锥虫活性成分，基于此，来自埃及 Deraya 大学、Minia 大学等机构的研究人员开展了相关研究，旨在挖掘迷迭香根系内生真菌的抗锥虫潜力，为抗锥虫药物的研发提供新的思路和物质基础。该研究成果发表在《Scientific Reports》上。
研究人员主要采用了以下关键技术方法：首先通过表面消毒和选择性培养基从迷迭香根系分离纯化内生真菌，并利用 18S rRNA 基因和内转录间隔区（ITS）测序进行分子鉴定；接着采用固相米饭培养基发酵真菌，经乙酸乙酯萃取获得代谢产物；然后运用超高效液相色谱 - 高分辨电喷雾质谱（LC - HR - ESI - MS）进行代谢组学分析，结合天然产物数据库（DNP、MarinLit）鉴定代谢物；通过体外抗锥虫活性实验，以苏拉明（Suramin）为阳性对照，测定提取物对布氏锥虫（T. brucei）的半数抑制浓度（IC??）；最后利用分子对接技术，将鉴定的代谢物与锥虫关键酶 Rhodesain（PDB ID: 6EXQ）和鸟氨酸脱羧酶（ornithine decarboxylase，PDB ID: 4ZGY）进行对接，分析其相互作用模式。
结果与讨论
内生真菌的分离鉴定与系统发育分析
通过分子鉴定和系统发育分析，从迷迭香根系分离出 3 株内生真菌，分别鉴定为球形枝孢霉（Cladosporium sphaerospermum，UR1）、罂粟链格孢（Alternaria papavericola，UR2）和茎生篮状菌（Talaromyces stititatus，UR3）。系统发育树显示，它们分别属于不同的真菌类群，具有遗传多样性。
抗锥虫活性评价
体外抗锥虫实验表明，3 株内生真菌的乙酸乙酯提取物均对布氏锥虫具有显著抑制作用。其中，UR1（枝孢霉）提取物的活性最强，IC??为 1.3 μg/mL，UR2（链格孢）和 UR3（篮状菌）提取物的 IC??分别为 3.2 μg/mL 和 3.5 μg/mL，显示出迷迭香根系内生真菌是抗锥虫活性物质的潜在来源。
代谢组学分析
利用 LC - HR - ESI - MS 对 3 株内生真菌提取物进行代谢组学分析，共鉴定出 47 种代谢物，涵盖萜类、酚类、生物碱、聚酮类、大环内酯类等多种化学类别。例如，从链格孢中鉴定出 phomalichenone F、alternabenzofuran A 等；枝孢霉中发现 herbarin B、cladosporin D 等；篮状菌中检测到 talaromarin E、talascortene F 等。这些代谢物结构多样，为抗锥虫活性成分的筛选提供了丰富的物质基础。
分子对接研究
分子对接结果显示，多数鉴定的代谢物在 Rhodesain 活性位点表现出中等至较高的对接分数（S = -3.82 至 - 6.10 kcal/mol），如 epi - cladoquinazoline（S = -6.00 kcal/mol）和 talaromyone A（S = -6.10 kcal/mol），它们通过氢键和 π - 氢键与关键氨基酸残基（如 Met 68、Cys 25）结合，可能抑制 Rhodesain 的催化活性。在鸟氨酸脱羧酶活性位点，部分代谢物表现出弱至中等对接分数（-2.33 至 - 5.9 kcal/mol），显示出对双靶点的潜在抑制作用，初步揭示了其抗锥虫作用机制。
研究结论与意义
本研究首次对迷迭香根系内生真菌的抗锥虫活性进行了系统研究，证实了枝孢霉、链格孢和篮状菌提取物具有显著的体外抗布氏锥虫活性，其作用机制可能与抑制锥虫关键酶 Rhodesain 和鸟氨酸脱羧酶有关。代谢组学分析揭示了这些真菌能够产生丰富多样的次生代谢产物，为抗锥虫药物的研发提供了大量候选化合物。该研究不仅拓展了植物内生真菌在抗寄生虫领域的应用，也为开发新型抗锥虫药物提供了新的资源和思路，有望缓解非洲锥虫病治疗的困境，对热带病防治具有重要的科学意义和临床应用潜力。
