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推荐：为探究 URSA 发病机制，研究人员聚焦滋养层细胞焦亡。发现 URSA 患者绒毛组织中 CASP1 转录及焦亡水平显著升高，miR-126-5p 表达下调且与 CASP1 负相关。过表达 miR-126-5p 可抑制 Caspase-1/GSDMD 通路，减少胚胎吸收率，为 URSA 诊疗提供新方向。
复发性自然流产（RSA）如同笼罩在育龄女性头顶的阴云，约 1%-5% 的孕妇受其困扰，其中半数病因不明，被称为不明原因复发性自然流产（URSA）。现有治疗手段如孕激素补充、抗凝治疗等，因机制非特异性和缺乏个体化策略，临床效果有限。深入探究 URSA 的发病机制，寻找精准的诊疗靶点，成为亟待突破的医学难题。
来自山东中医药大学的研究团队，针对 URSA 中滋养层细胞功能异常与免疫耐受失衡的核心问题，展开了一项富有创新性的研究。他们发现，miR-126-5p 通过调控 Caspase-1 依赖的滋养层细胞焦亡（一种由 Gasdermin-D（GSDMD）介导的程序性炎症性细胞死亡），在 URSA 的发生发展中扮演关键角色。该研究成果发表在《Cellular and Molecular Life Sciences》，为 URSA 的防治开辟了新视野。
研究人员采用了以下关键技术方法：
- 临床样本分析：纳入 35 例 URSA 患者和 35 例正常妊娠（NP）女性，收集绒毛组织和血清，通过 qRT-PCR、Western blotting（WB）、免疫荧光（IF）等检测基因和蛋白表达。
- 组学技术：对绒毛组织进行 RNA 测序（RNA-seq）和 4D 无标记定量蛋白质组学分析，筛选差异表达基因和通路。
- 细胞实验：在 HTR-8/SVneo 和 JEG-3 滋养层细胞中，转染 miR-126-5p 模拟物、抑制剂及对照，诱导焦亡后观察细胞形态和相关分子变化。
- 动物模型：构建 URSA（CBA/J 雌性 ×DBA/2 雄性）和 NP（CBA/J 雌性 ×BALB/c 雄性）小鼠模型，通过尾静脉注射进行基因过表达或药物干预，评估胚胎吸收率和胎盘组织变化。
- 分子机制验证：利用双荧光素酶报告实验验证 miR-126-5p 与 CASP1 mRNA 3' 非翻译区（3'UTR）的结合位点。
研究结果
1. Caspase-1 介导的焦亡在 URSA 绒毛组织中显著激活
RNA 测序和蛋白质组学分析显示，URSA 患者绒毛组织中焦亡通路显著富集，CASP1 mRNA 和蛋白水平均显著升高，同时伴随 GSDMD 切割产物 GSDMD-N、炎症因子 IL-1β 和 IL-18 的增加。免疫荧光证实，Caspase-1 和 GSDMD 的上调主要发生在滋养层细胞中。在 URSA 小鼠模型中，抑制 Caspase-1（如 VX-765）或 GSDMD（如 DSF）可显著降低胚胎吸收率，减少胎盘组织中的焦亡相关蛋白和炎症因子；而在正常妊娠小鼠中过表达 Caspase-1 则加剧胚胎吸收，证实了 Caspase-1 焦亡通路在 URSA 中的致病性。
2. miR-126-5p 下调与 CASP1 表达负相关
RNA 测序筛选出 URSA 中显著下调的 miRNAs，其中 miR-126-5p 与 CASP1 的负相关性最强。qRT-PCR 和荧光原位杂交（FISH）验证，URSA 患者绒毛组织中 miR-126-5p 表达显著低于正常妊娠组，且其表达水平与 CASP1 mRNA 呈负相关。双荧光素酶报告实验证实，miR-126-5p 通过直接结合 CASP1 mRNA 的 3'UTR 抑制其翻译。在滋养层细胞中，过表达 miR-126-5p 可减少 CASP1 蛋白、GSDMD-N 的生成及炎症因子释放，抑制焦亡形态学变化；而抑制 miR-126-5p 则增强焦亡反应。
3. miR-126-5p 通过调控 Caspase-1 焦亡通路防治 URSA
在 URSA 小鼠模型中，尾静脉注射 miR-126-5p 模拟物可显著提高胎盘组织中 miR-126-5p 水平，降低胚胎吸收率，减少 Caspase-1、GSDMD-N 和炎症因子表达；若同时过表达 Caspase-1（Flag-mCasp1），则可逆转 miR-126-5p 的保护作用。相反，注射 miR-126-5p 抑制剂会加剧胚胎吸收，而 Caspase-1 抑制剂 VX-765 可缓解这一效应。这些体内实验充分证明，miR-126-5p 通过抑制 Caspase-1/GSDMD 通路发挥抗 URSA 作用。
研究结论与意义
本研究揭示了 URSA 发病的新机制：miR-126-5p 表达下调导致 CASP1 抑制解除，激活滋养层细胞焦亡和局部过度炎症反应，最终引发胚胎丢失。作为首个证实 miR-126-5p 调控滋养层焦亡参与 URSA 的研究，不仅拓展了对 URSA 免疫 - 炎症机制的认识，更提供了双重价值的生物标志物 ——miR-126-5p 既可用作 URSA 的诊断指标（其表达水平与正常妊娠组差异显著），又可通过基因治疗手段（如模拟物递送）成为潜在治疗靶点。
值得注意的是，研究首次将非编码 RNA 调控与焦亡通路结合，为 URSA 的精准医疗策略提供了创新方向。未来若能进一步探索 miR-126-5p 在非经典焦亡通路（如 Caspase-4/5/11 介导途径）中的作用，将更全面揭示其调控网络。总之，这项研究为 URSA 的病理机制解析和临床转化研究奠定了重要基础，有望推动该领域从 “对症治疗” 向 “精准靶向治疗” 的跨越。
