基于Xpert裂解液联合MALDI-TOF MS的阳性血培养快速鉴定方法的临床评价：一种高效、省时的院内解决方案

本研究针对血流感染（BSIs）病原体鉴定耗时长、成本高的问题，开发了Xpert Lysate-based Method联合MALDI-TOF MS（基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱）的快速检测方案。结果显示，该方法在种水平鉴定准确率达96.18%，操作仅需10分钟，显著优于传统培养法（15-72小时），为BSIs的早期抗生素精准治疗提供了高效技术支撑。

　　

血流感染（BSIs）是全球高死亡率疾病，每年导致约1000万死亡病例，占全球总死亡率的20%。传统血培养作为诊断"金标准"需1-7天，而延迟治疗每增加1小时，患者死亡率显著上升。虽然宏基因组测序（mNGS）等新技术涌现，但高假阳性率和成本限制了其应用。临床微生物实验室亟需一种快速、准确且经济的病原体鉴定方案。

浙江省中医院联合三家医院的研究团队开发了基于Xpert MTB/RIF试剂盒裂解液的Xpert Lysate-based Method，结合MALDI-TOF MS技术，实现了阳性血培养（PBCs）的快速鉴定。该研究纳入629例单微生物PBCs和11例多微生物PBCs，通过与传统培养法对比，验证了新方法的效能。

研究采用四项关键技术：1）临床样本多中心采集（四家医院631例PBCs）；2）模拟接种血培养（含流感嗜血杆菌等9种病原体）；3）Xpert裂解液处理（氢氧化钠-异丙醇体系裂解红细胞）；4）MALDI-TOF MS鉴定（Bruker MicroFlex LT系统，评分阈值设定为1.500-2.000）。

研究结果

临床样本特征：79种病原体被检出，前五位分别是大肠杆菌（21.61%）、肺炎克雷伯菌（14.35%）、表皮葡萄球菌（9.03%）、头状葡萄球菌（6.45%）和金黄色葡萄球菌（5.32%）。

无评分阈值的鉴定率：物种水平准确率96.18%（605/629），属水平97.30%。革兰阳性菌（GPs）表现最佳（98.82%），厌氧菌最低（85.00%）。

评分阈值影响：当MALDI-TOF MS置信评分≥1.500时，总体鉴定率达94.66%。其中GPs达98.25%，GPs>GNs（93.54%）>厌氧菌（70.00%）>真菌（94.74%）。常见BSI病原体（如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌）的评分中位数均≥2.000，显示高可靠性。

多微生物PBCs鉴定：11例中10例成功鉴定出至少1种病原体，平均评分1.985。

操作效率：全程仅需10分钟手工操作，15-20分钟出结果，远快于传统培养法（15-72小时）和短期培养法（4-6小时）。

结论与意义

该研究证实Xpert Lysate-based Method在鉴定性能上不劣于传统培养法，且具有三大优势：1）速度革命：将TAT（周转时间）从数天缩短至20分钟；2）成本效益：利用现有结核诊断设备（Xpert MTB/RIF）资源，适合中低收入国家推广；3）广谱性：对GPs（尤其凝固酶阴性葡萄球菌）的鉴定准确率突破性提升至93.89%，解决了既往方法对GPs灵敏度不足的难题。

局限性包括对铜绿假单胞菌等"脆弱菌"的鉴定率较低（53.33%），以及无法同步提供耐药表型信息。未来可探索将该方法与耐药基因检测联用，进一步优化BSIs的精准诊疗路径。论文发表于《BMC Microbiology》，为临床微生物实验室提供了可无缝整合至日常工作的创新方案。