香港市售部分水解婴儿配方奶粉中蛋白质片段及肽的致敏性评估研究

针对部分水解婴儿配方奶粉(pHF)作为牛奶蛋白过敏(CMPA)替代品的争议问题，香港理工大学团队通过top-down/bottom-up蛋白质组学技术分析4种pHF品牌，发现pHF-A/B含>14 kDa的β-乳球蛋白(BLG)和α-乳白蛋白(ALA)致敏大片段，而pHF-D中80%肽段<2 kDa且无致敏性，为临床选择pHF提供重要依据。

　　

牛奶蛋白过敏(CMPA)是困扰婴幼儿的常见问题，全球1岁儿童发病率达0.5%-3%。部分水解婴儿配方奶粉(pHF)本应作为CMPA患儿的替代食品，但其预防过敏的效果却存在巨大争议——德国GINI研究显示pHF可降低特应性皮炎风险，而法国队列研究却报告可能增加喘息和食物过敏风险。这种矛盾背后，不同品牌pHF的蛋白质水解工艺差异可能是关键混杂因素。

香港理工大学未来食品研究院团队在《Food Chemistry》发表的研究，首次系统评估了香港市场4种pHF品牌的蛋白质片段和肽谱。研究人员采用氯仿-甲醇沉淀法同步提取蛋白质片段(界面沉淀)和肽段(上层水相)，结合自上而下(top-down)和自下而上(bottom-up)蛋白质组学技术，通过Orbitrap Fusion Lumos质谱仪进行数据分析。致敏性预测采用AllerCatPro v.2.0工具，该平台整合4979种已知过敏原序列和714个代表性三维致敏表位结构，通过BLASTP比对和三维结构相似性分析(阈值93%)进行评估。

研究结果揭示：

1. 蛋白质片段和肽谱差异
   SDS-PAGE显示pHF-A/B含>15 kDa大分子片段，显著多于其他品牌(p<0.05)。质谱鉴定出297种蛋白质形态，包括关键过敏原BLG(18.2 kDa)和ALA(14.1 kDa)的完整片段。

2. 致敏性评估
   pHF-D中71.5%肽段<2 kDa且无致敏性，符合美国儿科学会(AAP)对pHF的定义。而pHF-A/B含3-7个高致敏片段(相似性≥93%)，pHF-C更检出16个致敏片段。特别值得注意的是2.4 kDa的ALA肽段P00711[78-98]，虽小但含已知IgE结合表位(相似性93.3%)。

3. 分子大小与致敏性关系
   BLG和ALA的片段分子量对数与致敏性呈强正相关(R²=0.66-0.67，p<0.001)。>4.5 kDa片段多含完整致敏表位，如BLG的P02754[17-178]含6个致敏区域(相似性100%)。

4. 共同致敏表位
   序列比对发现，高致敏片段多含BLG的93-130位和ALA的78-98位氨基酸区域，与已知IgE结合表位重合。

这项研究首次揭示香港市售pHF存在显著差异：pHF-A/B含完整过敏原片段，pHF-D安全性最佳。结果提示当前AAP仅基于分子量(<5 kDa)的标准不足，需结合致敏表位分析。研究为优化pHF水解工艺指明方向——应针对性破坏BLG的93-130区和ALA的78-98区，推荐使用可切割脂肪族/芳香族氨基酸的蛋白酶K。

该成果对临床实践具有双重意义：一方面指导医生根据致敏风险选择pHF品牌，另一方面呼吁建立基于蛋白质组学和表位分析的新监管标准。香港理工大学团队建立的氯仿-甲醇沉淀联合质谱技术方案，为食品致敏性评估提供了高效可靠的新范式。