蛛网膜下腔出血后脑膜微环境时空动态变化调控淋巴功能：从炎症反应到组织重塑的机制探索

本研究针对蛛网膜下腔出血(SAH)后脑膜淋巴引流功能(mLVs)动态变化的调控机制，通过单细胞RNA测序(scRNA-seq)和空间转录组学(ST-seq)技术，揭示了脑膜微环境从急性期"炎症反应"到亚急性期"组织重塑"的时空转化规律，发现胎盘生长因子(PGF)是促进脑膜淋巴内皮细胞(mLECs)修复的关键因子，为SAH后继发性脑损伤治疗提供了新靶点。

　　

脑科学领域长期存在一个关键难题：当脑血管破裂导致蛛网膜下腔出血(SAH)时，为何脑膜淋巴系统的引流功能会先急剧下降又逐渐恢复？这个现象背后隐藏着怎样的细胞和分子机制？浙江大学医学院附属第二医院的研究团队在《Journal of Neuroinflammation》发表的最新研究，通过多组学技术揭开了这一谜题。

SAH是致死率极高的出血性卒中类型，血液进入蛛网膜下腔会引发级联炎症反应。虽然已知脑膜淋巴管(mLVs)能清除红细胞和免疫细胞，但其功能在SAH后24小时严重受损、72小时又部分恢复的动态变化机制不明。这项研究创新性地采用单细胞分辨率技术，描绘了脑膜微环境从"炎症风暴"到"修复重建"的完整演变图谱。

研究团队运用四大关键技术：1) 对SAH小鼠模型(Sham/24h/72h组)进行scRNA-seq和ST-seq测序；2) 流式细胞术分析脑膜免疫细胞组成；3) 免疫荧光示踪淋巴引流功能；4) 通过重组蛋白(PGF/VEGF-C)和抗体阻断实验验证靶点功能。

早期脑膜转录谱特征
分析22,721个单细胞数据发现：稳态下脑膜以成纤维细胞和内皮细胞为主；SAH 24h时髓系细胞(占免疫细胞80%)主导炎症反应，其中单核来源的M01巨噬细胞高表达Spp1，N03中性粒细胞通过CXCL2-CXCR2通路自我招募；72h时成纤维细胞扩增5倍，F01亚型成为主导，伴随胶原沉积增加。空间定位显示炎症细胞在mLVs"热点区"富集。

免疫细胞动态演变
巨噬细胞经历从促炎(M01)到抗原呈递(M02)的转化，伪时序分析揭示M01→M02→M03的分化轨迹。中性粒细胞中，N03亚群通过分泌TNF和IL-1β加剧急性期炎症，其自我招募机制可能成为治疗靶点。淋巴细胞在72h时T细胞比例增加，激活的B细胞通过MHC II分子与CD4⁺ T细胞互作。

成纤维细胞的核心作用
鉴定出5个成纤维细胞亚群：F01(Pgf⁺)与血管生成相关，72h时占比提升至45%；F02(Apoe⁺)维持细胞外基质；增殖型成纤维细胞通过CSF1-CSF1R信号调控巨噬细胞极化。空间分析显示F01在mLVs周围聚集，伴随促修复因子分泌增加。

PGF的关键修复作用
细胞互作网络显示，72h时mLECs接收的VEGF信号中，PGF-VEGFR1互作强度最高。实验证实：急性期PGF治疗较VEGF-C更能维持Lyve1⁺血管密度，使dCLNs荧光微球体积增加2.1倍；而PGF阻断会延缓mLVs功能恢复，加重神经功能缺损。

这项研究首次系统阐释了SAH后脑膜微环境的时空重塑规律：急性期髓系细胞浸润导致淋巴功能障碍，亚急性期成纤维细胞通过PGF等因子启动修复。该发现不仅为理解CNS损伤后淋巴调控提供新范式，更提示靶向PGF可能是改善SAH预后的新策略。未来需进一步探索长期PGF治疗是否诱发病理性淋巴管增生，以及如何优化干预时间窗。