含 pc-LACK 的免疫脂质体作为新型抗原递送系统携带 IL-12 基因在硕大利什曼原虫感染小鼠模型中的研究

【字体: 时间:2025年05月17日 来源:Journal of Parasitic Diseases

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  为探究脂质体 DNA 疫苗联合重组质粒与细胞因子佐剂对硕大利什曼原虫(L. major)的防护效果,研究人员开发含 LACK 基因与 IL-12 的阳离子脂质体(DOTAP:DOPE: 胆固醇 = 2:1:1)。实验显示其可显著降低脾虫负荷,提升 IFN-γ、IgG2a 等水平,为抗利什曼原虫疫苗研发提供新方向。

  
该研究聚焦于开发第一代基于脂质体的利什曼原虫疫苗。此疫苗利用编码利什曼原虫激活 C 激酶受体同源物(LACK)的克隆基因以及白细胞介素 12(IL-12)。研究旨在评估一种将重组质粒与细胞因子佐剂结合的脂质体 DNA 疫苗对硕大利什曼原虫(L. major)的防护效力。研究人员开发了一种阳离子脂质制剂,其由 1,2 - 二油酰基 - 3 - 三甲基铵丙烷(DOTAP)、二油酰基磷脂酰乙醇胺(DOPE)和胆固醇按 2:1:1 的比例混合而成。这些包含 DOTAP 和 DOPE 的阳离子脂质体与 pc-LACK 和 pc-IL-12 佐剂配对,以探索其作为刺激免疫系统的疫苗候选物的潜力。BALB/c 小鼠接受了各种纳米脂质体和非脂质体化合物的皮下免疫,每三周一次,共三次。在最后一次加强免疫后,给免疫小鼠皮下注射 50 μL 溶液中含 1×106个静止期 L. major 前鞭毛体进行攻击。攻击后的评估包括监测病变发展、评估脾脏寄生虫负荷以及分析细胞和体液免疫反应,这涉及测量 IL-4 和 IFN-γ 水平、培养脾细胞以及定量对照组和免疫组中的总 IgG、IgG1 和 IgG2a 抗体。研究表明,用脂质体质粒 LACK(Lip-pc-LACK)接种的小鼠在受到 L. major 攻击时,脾脏中的寄生虫负荷显著降低(P<0.001)。在 Lip-pc-LACK+Lip-pc-IL-12 组中发现寄生虫负荷最低。此外,与其他组相比,用 Lip-pc-LACK、pc-LACK 和 Lip-pc-LACK+Lip-pc-IL-12 免疫的 BALB/c 小鼠表现出最高水平的 IFN-γ 和 IgG2a,同时 IgG1 和 IL-4 水平升高(P<0.001)。使用含 DOTAP 和 / 或 DOPE 的脂质体结合 LACK 进行免疫的研究结果表明,阳离子脂质体可能是推进抗 L. major 疫苗的有效免疫佐剂。

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