睑板腺癌（Meibomian Gland Carcinoma, MGC）是一种恶性程度高、预后差的眼睑肿瘤，其早期症状常与良性病变相似，容易导致误诊或漏诊，使得患者往往错过最佳治疗时机。目前，手术切除联合区域淋巴结清扫是 MGC 的标准治疗方法，但术后复发、转移风险较高，且其发病机制尚未完全明确，亟需寻找有效的分子靶点以提升治疗效果、改善患者预后。

在肿瘤研究领域，E2F 转录因子 2（E2F transcription factor 2, E2F2）作为调控细胞周期、分化和凋亡的关键分子，其异常表达与多种肿瘤的发生发展密切相关。已有研究表明，E2F2 的失调可能与 DNA 甲基化这一表观遗传修饰有关，而 DNA 甲基化通过在 CpG 二核苷酸的胞嘧啶第 5 位碳原子上添加甲基基团，可在不改变 DNA 序列的情况下调控基因表达，导致肿瘤抑制基因沉默。然而，E2F2 在 MGC 中的表达情况及其与 DNA 甲基化的关系尚不清楚。

为填补这一研究空白，天津医科大学眼科医院的研究人员开展了一系列研究，相关成果发表在《BMC Cancer》。

研究人员主要运用了以下关键技术方法：

• 组织样本分析：收集 3 例正常睑板腺组织和 36 例 MGC 患者的组织样本，构建组织微阵列（TMA），通过免疫组织化学（IHC）染色检测 E2F2 及相关蛋白的表达。

• 细胞功能实验：培养原代 MGC 细胞，利用小干扰 RNA（siRNA）敲低 E2F2 表达，通过慢病毒载体过表达 E2F2，进行 CCK-8 实验、伤口愈合实验、Transwell 实验（检测细胞迁移和侵袭能力），并利用流式细胞术分析细胞凋亡和细胞周期。

• 表观遗传研究：使用 DNA 甲基化抑制剂 5-aza-2’- 脱氧胞苷（5-aza-2-dc）处理 MGC 细胞，通过 RNA 测序（RNA-Seq）筛选差异表达基因，运用甲基化特异性 PCR（MSP）检测 E2F2 启动子区甲基化水平。

研究结果

E2F2 在 MGC 中的表达特征

通过 TIMER2.0 数据库分析发现，E2F2 在部分恶性肿瘤（如结肠腺癌、直肠腺癌）中表达下调。在 MGC 细胞和组织中，E2F2 的 mRNA 和蛋白水平均显著低于正常睑板腺细胞和组织。免疫组化结果显示，E2F2 表达与增殖标志物 Ki-67 呈负相关，与细胞周期抑制因子 P21、P27 呈正相关，提示 E2F2 可能具有抑癌作用。

E2F2 对 MGC 细胞生物学行为的影响

功能实验表明，敲低 E2F2 可显著促进 MGC 细胞的增殖、迁移和侵袭能力，抑制细胞凋亡，并使细胞周期阻滞于 S 期，同时下调上皮标志物 E - 钙粘蛋白（E-cadherin）表达，呈现上皮 - 间质转化（EMT）特征；而 E2F2 过表达则产生相反效果，抑制肿瘤细胞的恶性行为。

E2F2 表达与 DNA 甲基化的关系

经 5-aza-2-dc 处理后，MGC 细胞中 E2F2 表达显著上调。RNA 测序结果显示，与对照组相比，处理组有 87 个差异表达基因（DEGs），其中 72 个上调、15 个下调，这些基因主要富集于 DNA 复制、细胞周期等生物学过程和信号通路。MSP 实验证实，5-aza-2-dc 可降低 E2F2 启动子区甲基化水平，表明 E2F2 的低表达可能由 DNA 甲基化介导。此外，抑制甲基化可抑制 MGC 细胞的增殖、迁移和侵袭，效果与 E2F2 过表达相似。

研究结论与意义

本研究首次证实 E2F2 在 MGC 中显著低表达，其敲低通过调控细胞周期、诱导 EMT 等途径促进肿瘤进展，而 DNA 甲基化是导致 E2F2 表达沉默的重要机制。使用 5-aza-2-dc 等甲基化抑制剂可通过去甲基化作用恢复 E2F2 表达，进而抑制 MGC 细胞的恶性行为。这些发现揭示了 E2F2 作为 MGC 潜在治疗靶点的重要价值，为开发基于 E2F2 的分子靶向治疗和个体化精准治疗提供了新的理论依据。未来研究可进一步探索 E2F2 与其他信号通路的相互作用，以及甲基化抑制剂在临床应用中的安全性和有效性，推动相关疗法从实验室走向临床，为 MGC 患者带来新的希望。