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本文聚焦对乙酰氨基酚（APAP）镇痛机制，发现其通过抑制二酰基甘油脂肪酶 α（DAGLα）减少内源性大麻素 2 - 花生四烯酰甘油（2-AG）合成，揭示 APAP 依赖大麻素 1 型受体（CB1）的镇痛新通路，为镇痛药物开发提供靶点。
研究背景与目的
对乙酰氨基酚（APAP）是常用解热镇痛药，但其作用机制尚未完全明确。传统观点认为其通过抑制中枢环氧化酶 2（COX2）发挥作用，但需毫摩尔级浓度，与治疗浓度不符。内源性大麻素（eCB）系统参与疼痛调节，且 APAP 的镇痛效果依赖大麻素 1 型受体（CB1），但其具体交互机制尚不清晰。本研究旨在探讨 APAP 与内源性大麻素系统的相互作用，解析其镇痛的分子机制。
关键实验方法与结果
电生理实验：APAP 抑制内源性大麻素信号
在海马自突触神经元模型中，APAP（10-100 μM）呈浓度依赖性抑制去极化诱导的兴奋抑制（DSE），而对 Gi/o蛋白介导的 GABA-B 信号无影响，表明其作用特异性靶向 CB1 受体信号。外源性 2 - 花生四烯酰甘油（2-AG）处理显示，APAP 不影响 CB1 受体对 2-AG 的响应，提示其作用位点可能在 2-AG 合成阶段。
脂质分析与酶活性测定：APAP 靶向抑制 DAGLα
在过表达 DAGLα 的 HEK293 细胞中，APAP（100 μM）可减少 25 μM S-AG 诱导的 2-AG 生成（抑制约 65%），且对 DAGLβ 无显著影响。酶活性测定显示，APAP（30 μM）选择性抑制 DAGLα 活性，对 DAGLβ 无作用，进一步通过 HT-01 探针实验证实 APAP 不结合 DAGLβ 活性位点。
活体动物实验：CB1 依赖的抗伤害感受作用
热板实验表明，APAP（300 mg/kg）和 DAGL 抑制剂 RHC-80267（20 mg/kg）在野生型小鼠中延长爪 withdrawal 潜伏期，但在 CB1 敲除（KO）小鼠中作用消失，证实 APAP 的镇痛效果依赖 CB1 受体。N - 酰基磷脂酰乙醇胺磷脂酶 D（NAPE-PLD）KO 小鼠实验显示，APAP 镇痛不依赖花生四烯酸乙醇胺（anandamide）合成通路。
作用机制与模型构建
基于上述结果，提出 APAP 镇痛的新模型：APAP 通过抑制 DAGLα，减少 2-AG 合成，进而降低 CB1 受体激活，阻断促痛觉传导的 DAGLα/CB1 神经回路。该模型解释了 APAP 在治疗浓度（5-20 μg/mL，33-133 μM）下的作用，且与传统 COX 抑制机制形成互补。
讨论与意义
传统观点认为激活 CB1 受体具有镇痛作用，但本研究发现抑制 DAGLα/CB1 通路亦可产生抗伤害感受效应，提示内源性大麻素系统在痛觉调节中的双重角色。DAGLα 可能成为新型镇痛靶点，为开发非阿片类、非 NSAID 类镇痛药提供方向。研究同时指出，APAP 的镇痛作用可能是多机制的，包括直接抑制 DAGLα 和代谢产物间接作用。
研究局限与展望
研究未明确 APAP 作用的具体神经回路，且未探讨胶质细胞中 cannabinoid 信号的贡献。未来需进一步验证 DAGLα/CB1 通路在不同痛觉模型中的普遍性，并评估其在人类中的临床转化潜力。
