中间布鲁氏菌 IITR130 水解酶对 PET 的酶促降解及其基因组学洞察

【字体: 时间:2025年05月18日 来源:Biodegradation 3.1

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  塑料污染(尤其 PET)已成重大环境问题,需创新降解策略。本研究对可降解 PET 的中间布鲁氏菌 IITR130 开展基因组及功能特性研究,发现其含 PET 降解相关酶基因,鉴定的 Hy1 水解酶具高效降解能力,为塑料废物管理提供新方向。

  
塑料污染尤其是聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)污染已成为重大环境问题,亟需创新且可持续的降解策略。本研究聚焦于可降解 PET 的中间布鲁氏菌(Brucella intermedia)IITR130 的基因组和功能特性。对 IITR130 进行混合基因组测序,发现其包含两条染色体,总大小为 4.59 兆碱基对(Mbp)。基因组注释显示,该菌存在参与 PET 片材生物降解途径的关键酶,包括水解酶(hydrolases)、环羟基化双加氧酶(ring hydroxylating dioxygenases)、原儿茶酸 3,4 - 双加氧酶(protocatechuate 3,4 dioxygenases)以及代谢多种天然和合成塑料的基因。
研究鉴定、表达并表征了一个 24 kDa 的水解酶基因 Hy1,其最佳催化活性在 37°C 和 pH 8.5 条件下。扫描电子显微镜(SEM)和傅里叶变换红外光谱(FTIR)证实,经 Hy1 蛋白处理的 PET 表面发生显著降解,导致表面侵蚀、裂纹形成,且在 2150–2550 cm-1和 2950–3350 cm-1范围内的官能团发生修饰,分别提示存在 O=C=O 伸缩振动和 O–H 伸缩振动。菌株 IITR130 产生的 PET 降解代谢物被鉴定为对苯二甲酸单甲酯(MMT)和对苯二甲酸(TPA)。荧光猝灭实验显示,Hy1 对双(2 - 羟乙基)对苯二甲酸酯(BHET)的底物亲和力更高(Kd = 148.2),比对苯二甲酸(TPA)(Kd = 674)更高。此外,Hy1 蛋白的系统发育分析表明,其含有保守的催化三联体(Ser108、His188、Asp155),属于水解酶家族 III,与来自酒井 Ideonella(Ideonella sakaiensis)的 PET 降解水解酶 PETase 同属一个进化枝。这些结果表明,中间布鲁氏菌 IITR130 作为高效生物催化剂在 PET 生物降解中具有潜力,可适当用于塑料废物管理。

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