Limettin 和 PD98059 通过调控 p-ERK1/2/p-GSK3β/p-CREB/BDNF 通路缓解链脲佐菌素诱导的小鼠散发性阿尔茨海默病样病理研究

为探究散发性阿尔茨海默病（SAD）治疗新途径，研究人员以链脲佐菌素（STZ）诱导的小鼠模型，研究 Limettin 和 PD98059 的神经保护作用。发现二者可改善认知行为，下调 p-ERK1/2，上调 p-GSK3β（Ser9）、p-CREB（Ser133）及 BDNF，减轻神经炎症和 Aβ 沉积，为 SAD 治疗提供新方向。

　　阿尔茨海默病（AD）如同隐匿的记忆杀手，正悄然侵蚀着全球数以千万计老年人的生活。作为最常见的痴呆类型，散发性阿尔茨海默病（SAD）占 AD 病例的 90% 以上，其核心病理特征是大脑内 β- 淀粉样蛋白（Aβ）沉积和 tau 蛋白过度磷酸化，伴随神经炎症、氧化应激和胆碱能系统损伤。目前临床常用的乙酰胆碱酯酶抑制剂（如多奈哌齐）和 NMDA 受体拮抗剂（如美金刚）虽能改善部分症状，但无法阻止疾病进展，且存在显著副作用，开发安全有效的新型治疗药物迫在眉睫。

在此背景下，来自埃及 Misr 科学与技术大学、开罗大学以及波兰卢布林医科大学等机构的研究人员，针对 SAD 的病理机制，开展了一项关于天然化合物 Limettin（一种呋喃香豆素）和 MEK 抑制剂 PD98059 的神经保护作用研究。该研究成果发表在《Journal of Neuroimmune Pharmacology》，为 SAD 的治疗提供了重要的实验依据和新方向。

研究人员采用脑室内注射链脲佐菌素（STZ，3 mg/kg）建立小鼠 SAD 模型，通过 Y 迷宫、Morris 水迷宫（MWM）行为学测试评估认知功能，结合 ELISA、Western Blot、组织病理学和免疫组化等技术，深入探讨 Limettin（15 mg/kg）和 PD98059（10 mg/kg）对 SAD 模型小鼠的保护作用及潜在机制。

行为学测试：认知功能的显著改善

STZ 诱导的 SAD 模型小鼠在 Y 迷宫测试中表现出短期记忆显著受损，臂进入次数和自发交替百分比（SAP）分别降低 30% 和 47%。而 Limettin 和 PD98059 治疗 3 周后，臂进入次数增加 40%，SAP 提升 30%-33%，表明二者可明显改善小鼠的短期记忆。在 Morris 水迷宫测试中，模型组小鼠的平均逃避潜伏期（MEL）延长 234%，目标象限停留时间减少 41%，平台穿越次数减少 64%，显示空间记忆严重缺陷。经药物治疗后，MEL 缩短 35%-42%，目标象限停留时间增加 41%-48%，平台穿越次数增加 74%-153%，其中 Limettin 在改善空间记忆方面效果更优。

信号通路调控：p-ERK1/2/p-GSK3β/p-CREB/BDNF 通路的关键作用

Western Blot 结果显示，SAD 模型小鼠海马区 p-ERK1/2 表达上调 6.4 倍，而 p-GSK3β_（Ser9）、p-CREB_（Ser133）和脑源性神经营养因子（BDNF）分别下调 78%、77% 和 59%。Limettin 和 PD98059 治疗可显著抑制 p-ERK1/2 激活（下调 44%-47%），同时上调 p-GSK3β_（Ser9）（2.4 倍）、p-CREB_（Ser133）（230%-240%）和 BDNF（108%-109%），表明二者通过抑制 ERK1/2 通路，激活 GSK3β_（Ser9）/CREB/BDNF 信号轴，发挥神经保护作用。

神经炎症与 Aβ 沉积：炎症因子与病理蛋白的显著抑制

ELISA 检测发现，模型组小鼠海马区核因子 -κB（NF-κB）、白细胞介素 - 6（IL-6）、β- 分泌酶（BACE-1）和 Aβ 水平分别升高 129%、170%、203% 和 247%。药物治疗后，这些炎症因子和病理蛋白均显著降低，NF-κB 减少 37%-39%，IL-6 减少 51%-55%，BACE-1 减少 52.5%-54%，Aβ 减少 56%-59%，表明 Limettin 和 PD98059 可有效抑制神经炎症和 Aβ 生成，阻断病理级联反应。

组织病理学与免疫组化：神经元保护与 tau 蛋白沉积减少

HE 染色显示，SAD 模型小鼠海马 CA3 区出现严重神经元丢失、细胞萎缩和胶质细胞浸润，而药物治疗组神经元结构明显改善，Limettin 组效果更为显著，仅见少量退化神经元和轻微胶质细胞反应。甲苯胺蓝染色显示，模型组完整神经元数量减少 59%，经 Limettin 和 PD98059 治疗后，完整神经元数量分别增加 2.2 倍和 1.9 倍，证实二者对神经元具有显著保护作用。免疫组化结果显示，模型组 p-tau 蛋白表达显著升高（55 倍），药物治疗后 p-tau 沉积减少 43%-74%，其中 Limettin 的抑制效果优于 PD98059。

本研究证实，Limettin 和 PD98059 通过抑制 p-ERK1/2 通路，激活 p-GSK3β_（Ser9）/p-CREB/BDNF 信号轴，减轻神经炎症和氧化应激，抑制 Aβ 沉积和 tau 蛋白过度磷酸化，从而改善 SAD 模型小鼠的认知功能和神经元病理。这一发现不仅揭示了 SAD 治疗的新靶点和作用机制，还为天然化合物（如 Limettin）和小分子抑制剂（如 PD98059）的临床转化提供了实验基础。未来研究可进一步通过抑制剂 / 阻断剂验证该通路的作用，并开展人体临床试验，评估 Limettin 的安全性和有效性，为 SAD 患者带来新的治疗希望。