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基于单克隆抗体FMDV3AB-2E4的竞争性ELISA检测技术开发及其在口蹄疫病毒非结构蛋白抗体诊断中的应用
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年05月18日 来源:Veterinary Research Communications 1.8
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研究人员针对口蹄疫病毒(FMDV)感染诊断难题,开发了靶向非结构蛋白(NSP)3B的单克隆抗体(MAb)#FMDV3AB-2E4,并建立竞争性ELISA(cELISA)检测体系。该技术对多物种血清检测显示95.54%灵敏度(DSn)和98.36%特异性(DSp),与市售PrioCHECK试剂盒及内部ELISA方法一致性达96.61%,为FMD防控提供跨物种检测工具。
口蹄疫(FMD)作为偶蹄动物最具传染性的病毒性疾病,每年造成全球重大经济损失。科学家们瞄准FMDV的七个血清型(O、A、C、Asia1、SAT1、SAT2、SAT3)共有的非结构蛋白(NSP)3AB3,通过杂交瘤技术培育出能特异性结合NSP 3B的单克隆抗体#FMDV3AB-2E4(IgG1亚型)。
这支"分子探针"被巧妙应用于竞争性ELISA(cELISA)检测体系——用重组蛋白r3AB3作抗原,当样本中存在NSP抗体时,会与标记抗体"争夺"抗原结合位点。通过分析932份血清(含202阳性样本)的受试者工作特征曲线,确定45%抑制率(PI)为临界值,使得牛、水牛、绵羊、山羊、猪和鹿等多物种样本检测准确率突破98%。
与市售PrioCHECK试剂盒的对比试验中,新方法在446份牛/山羊血清中展现出93.54%灵敏度(DSn)和97.46%特异性(DSp)。更令人振奋的是,在印度多地采集的3016份牛血清测试中,与传统r3AB3间接ELISA的吻合度高达96.61%。这项"物种通用型"检测技术的问世,正为全球FMD防控战役注入新动能。
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