健康猫血浆核小体浓度评估及分析前变量影响的研究

为明确猫血浆核小体检测方法及分析前变量影响，研究人员以 64 只健康猫为对象，探讨不同采血管类型、离心方案及处理时间对核小体浓度的作用。发现 EDTA 管结果更稳定，处理时间应≤60 分钟，离心方案无显著影响，为猫疾病诊断提供新方向。

　　

在生命科学和医学领域，核小体作为细胞凋亡的产物，其血浆浓度变化与多种疾病密切相关，如犬和人类的某些病症中核小体水平升高，使其作为生物标志物的潜力备受关注。然而，猫血液中核小体的检测尚未见报道，且在现有兽医和人类文献中，用于核小体分析的样本最佳采集管和处理技术存在差异。因此，开展猫血浆核小体浓度评估及分析前变量影响的研究，对于填补猫医学领域这一空白、建立可靠的检测方法具有重要意义。

为解决上述问题，来自美国多家研究机构（Veterinary Specialty Hospital By Ethos Veterinary Health 等）的研究人员开展了相关研究。他们以 64 只客户拥有的健康家猫为研究对象，旨在评估健康猫血液中的核小体浓度，并描述采集和处理方法（包括试管类型、离心方案和样品处理时间）的影响。研究结果表明，EDTA 管在评估 H3.1 核小体水平方面比柠檬酸钠和血清分离管提供了更一致的结果，且样品应在采集后 1 小时内处理，离心方案对核小体浓度无显著影响。该研究成果发表在《BMC Veterinary Research》上，为后续验证血浆核小体水平在诊断和监测各种猫疾病状态中的应用奠定了基础。

研究用到的主要关键技术方法包括：从 5 家兽医转诊医院招募 64 只健康猫，进行 9 次独立采血；血液样本通过外周插入的长外周静脉导管或直接静脉穿刺采集；将血液样本分别采集到 EDTA、血清分离管和柠檬酸钠管中；在不同时间点（15、30、60、120 分钟）和不同离心方案下处理样本；使用针对组蛋白 3.1（H3.1）的检测抗体的 ELISA（酶联免疫吸附试验）来测定核小体浓度；采用 Kruskal–Wallis 检验和 Dunn 多重比较检验进行统计分析。

试管类型变量

对 7 份猫血清分离管样本的核小体浓度分析显示，不同时间点的血清浓度范围较广，各处理时间的 H3.1 核小体水平无显著差异。与血清分离管相比，EDTA 和柠檬酸钠样本的核小体浓度总体较低。柠檬酸钠管样本在不同处理时间的 H3.1 核小体浓度无显著差异。由于原始时间点 H3.1 核小体水平变化较小，对 EDTA 样本的额外时间点进行了评估，发现 120 分钟处理的 EDTA 样本中的 H3.1 核小体水平显著高于所有其他 EDTA 时间点。

离心变量

在柠檬酸钠和 EDTA 管样本之间比较了三种不同的离心方案，由于研究中试管类型部分从血清分离管中分离的核小体血清浓度差异较大，因此离心变量分析排除了血清分离管样本的评估。无论离心方案如何，与柠檬酸钠相比，EDTA 管样本中的核小体水平变异性较小，标准差较小。在本研究中分析的离心速度和时间方面，柠檬酸钠或 EDTA 管组间或方案间均无显著差异。

研究结论表明，H3.1 核小体可以从健康猫的血液中成功定量，核小体浓度受试管选择影响，样品处理延迟超过 60 分钟会导致核小体浓度虚假升高，EDTA 管因与其他两种相比缺乏患者间变异性，在核小体水平的可靠性方面优于柠檬酸钠和血清分离管，所评估的离心方案不影响核小体浓度。讨论部分指出，与兽医和人类医学中的现有文献相反，该研究表明 EDTA 管在收集猫血样本以评估 H3.1 核小体水平方面优于柠檬酸钠管，这可能与物种差异有关。该研究是首次提供从猫血中成功定量 H3.1 核小体的技术，支持在猫中收集样本进行核小体检测时使用 EDTA 管，为未来确定核小体水平在猫中的临床相关性以及它们作为生物标志物在疾病预后中的作用的研究奠定了基础。