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鼻咽癌（NPC）放化疗易耐药，需新疗法。长沙医学院研究人员探讨龙葵碱作用，发现其体外体内抑制 NPC 生长，诱导铁死亡，靶向 HMOX1，调控 GPX4 等蛋白。为 NPC 治疗提供新方向。
在癌症治疗领域，鼻咽癌（NPC）是一种在中国南方高发的恶性肿瘤，其治疗面临着严峻挑战。早期患者虽可通过放疗治愈，但晚期患者在放化疗后极易出现转移、复发等耐药反应，导致治疗失败。因此，寻找新的有效治疗靶点和药物，改善鼻咽癌患者的预后，成为亟待解决的医学难题。天然化合物因其独特的生物活性和多靶点作用机制，在肿瘤治疗中展现出巨大潜力。龙葵碱（Solasodine）作为从传统草药中提取的甾体生物碱，已被证实对多种癌症具有抑制作用，但其在鼻咽癌中的作用机制尚不明确。基于此，长沙医学院的研究人员开展了相关研究，旨在揭示龙葵碱在鼻咽癌治疗中的潜在价值，该研究成果发表在《Scientific Reports》。
为探索龙葵碱对鼻咽癌的作用及机制，研究人员综合运用了多种关键技术方法。通过细胞实验（包括细胞活力检测、细胞周期分析、 colony formation 实验等）、动物实验（裸鼠异种移植模型）、网络药理学分析、分子生物学技术（Western blot 检测蛋白表达）以及细胞形态和代谢指标检测（如透射电子显微镜观察线粒体形态、ROS、GSH、Fe2?、MDA 等含量测定）等，系统研究了龙葵碱的抗肿瘤效应及作用靶点。
龙葵碱抑制 NPC 细胞活力和增殖
CCK8 实验表明，龙葵碱对 NPC 细胞系 HNE1 和 HONE1 的活力具有时间和浓度依赖性抑制作用。随着龙葵碱浓度升高（0-80μM）和作用时间延长（24-72h），细胞活力显著下降。处理 48μM 龙葵碱后，细胞出现明显的气球样变和肿胀等形态改变。集落形成实验显示，龙葵碱能剂量依赖性减少 HNE1 和 HONE1 细胞的克隆形成，表明其抑制细胞增殖。细胞周期分析发现，龙葵碱可使 HONE1 细胞阻滞于 G0/G1 期，HNE1 细胞阻滞于 S 期，影响 DNA 复制。
龙葵碱促进 NPC 细胞死亡
活 / 死细胞染色结果显示，龙葵碱处理后，NPC 细胞中红色死亡细胞比例显著增加，活细胞比例明显降低。Hoechst 染色和 Annexin V-FITC 凋亡检测显示，龙葵碱处理后细胞出现核固缩等凋亡特征，但凋亡率仅轻度升高，提示细胞死亡可能存在其他机制。
龙葵碱抑制裸鼠异种移植瘤生长
在裸鼠异种移植瘤模型中，龙葵碱（10mg/kg）腹腔注射可显著抑制 HNE1 细胞来源的肿瘤生长，肿瘤体积和重量均明显小于对照组。组织学检查显示，龙葵碱处理组肿瘤细胞核减少、间质间隙增大，Ki-67 表达降低，TUNEL 染色阳性细胞增多，表明龙葵碱在体内具有抗肿瘤活性且安全性良好。
网络药理学分析揭示铁死亡参与龙葵碱诱导的 NPC 细胞死亡
网络药理学分析显示，龙葵碱的潜在靶点与鼻咽癌差异表达基因交集得到 34 个共享靶点，其中 HMOX1 作为铁死亡关键调控基因脱颖而出。GO 富集分析显示这些靶点与应对 ROS、过氧化氢及调控凋亡过程等生物功能相关，提示龙葵碱可能通过诱导铁死亡发挥抗肿瘤作用。
龙葵碱诱导 NPC 细胞铁死亡特征
机制研究发现，龙葵碱处理后，NPC 细胞内 ROS、Fe2?、MDA（脂质过氧化标志物）水平显著升高，GSH（谷胱甘肽）含量显著降低，符合铁死亡的氧化应激特征。线粒体形态学观察显示，线粒体嵴破坏、肿胀，呈现铁死亡典型的线粒体改变。Western blot 结果显示，铁死亡相关蛋白 HMOX1、COX2 表达上调，而 GPX4、MUC1、SLC40A1 等铁死亡抑制蛋白表达下调。进一步通过抑制剂实验证实，铁死亡特异性抑制剂 Fer-1 和 Lip-1 可逆转龙葵碱诱导的细胞死亡，而凋亡、坏死、自噬抑制剂无此作用，明确铁死亡为主要作用机制。
研究结论与意义
本研究通过网络药理学结合实验验证，首次揭示龙葵碱通过靶向 HMOX1 诱导铁死亡，从而抑制鼻咽癌的进展。这一发现不仅为龙葵碱在鼻咽癌治疗中的应用提供了理论依据，也为鼻咽癌的治疗开辟了新的方向 —— 靶向铁死亡。铁死亡作为一种区别于传统凋亡的新型细胞死亡方式，为克服鼻咽癌放化疗耐药提供了新策略。然而，龙葵碱的治疗潜力仍需在患者来源的模型和临床试验中进一步验证。该研究为天然化合物在肿瘤治疗中的应用提供了范例，有望推动鼻咽癌治疗的新突破。
