编辑推荐：
为探究 RNA 甲基化修饰在糖尿病性骨质疏松（DOP）发病机制中的作用，研究人员以人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）为对象，发现高糖条件下 ALKBH5 表达升高、总 RNA m6A 水平降低，敲低 ALKBH5 可增强 FGF21 mRNA m6A 甲基化及与 YTHDF2 结合，上调成骨基因。该研究为 DOP 治疗提供新视角。
论文解读
糖尿病（DM）作为全球高发的慢性疾病，其并发症之一的糖尿病性骨质疏松（DOP）正悄然威胁着患者的骨骼健康。DOP 以骨量减少、骨脆性增加和骨折风险升高为特征，与单纯原发性骨质疏松相比，DOP 患者致残率和骨折风险更高。然而，其发病机制尚未完全明确，高血糖、激素失衡、晚期糖基化终产物（AGEs）堆积等复杂因素交织其中，使得寻找有效的防治靶点成为医学领域的迫切需求。
在这样的背景下，来自国内的研究人员聚焦于 RNA 甲基化修饰这一前沿领域，试图揭开 DOP 背后的分子机制。他们选择人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）作为研究对象，围绕成纤维细胞生长因子 21（FGF21）的 N6- 甲基腺苷（m6A）修饰展开研究，探讨 ALKBH5 蛋白在其中的调控作用。这项研究成果发表在《Biochemical and Biophysical Research Communications》，为 DOP 的防治提供了全新的思路。
主要研究技术方法
研究采用了多项关键技术：通过 RNA 测序（RNA-seq）筛选高糖（HG）与正常糖（NG）条件下 hBMSCs 中差异表达基因；利用甲基化 RNA 免疫沉淀测序（MeRIP-qPCR）检测 FGF21 mRNA 的 m6A 修饰水平；借助 RNA 免疫沉淀（RIP）技术分析 YTHDF2 蛋白与 FGF21 mRNA 的相互作用；运用碱性磷酸酶（ALP）染色和茜素红染色分别评估 hBMSCs 早期和成骨分化成熟阶段的矿化能力；通过逆转录定量 PCR（RT-qPCR）和蛋白质免疫印迹（Western blot）检测相关基因和蛋白的表达水平。
研究结果
高糖对 hBMSCs 的影响
通过比色法检测发现，与 NG 组相比，HG 组 hBMSCs 的总 RNA m6A 修饰水平显著降低（p=0.0003）。RNA-seq 分析显示，高糖条件下甲基转移酶 METTL3 等基因表达下调，而 demethylase ALKBH5 表达上调，提示 m6A 修饰相关酶的动态变化可能参与 DOP 的发生。
ALKBH5 对 FGF21 m6A 修饰的调控
在 HG 条件下敲低 ALKBH5 后，MeRIP-qPCR 结果显示 FGF21 mRNA 的 m6A 甲基化水平显著升高，同时 RIP 实验证实 YTHDF2 蛋白与 FGF21 mRNA 的结合增强。这表明 ALKBH5 通过催化 FGF21 的 m6A 去甲基化，减少其与 “阅读器” 蛋白 YTHDF2 的相互作用。
对成骨分化的影响
功能实验表明，抑制 ALKBH5 可上调 hBMSCs 中成骨相关基因的表达，ALP 染色和茜素红染色结果显示，成骨早期活性和矿化结节形成能力均增强。这提示 ALKBH5 可能通过调控 FGF21 的 m6A 修饰，抑制 hBMSCs 的成骨分化潜能。
研究结论与讨论
本研究首次揭示了 ALKBH5 在 DOP 中通过介导 FGF21 的 m6A 去甲基化调控 hBMSCs 成骨分化的分子机制。研究发现，高糖环境下 ALKBH5 表达升高，降低 FGF21 mRNA 的 m6A 甲基化水平，减少其与 YTHDF2 的结合，进而抑制成骨相关基因的表达，阻碍 hBMSCs 向成骨细胞分化。而敲低 ALKBH5 则通过增强 FGF21 的 m6A 甲基化及与 YTHDF2 的相互作用，促进成骨分化。
这一发现不仅拓展了 RNA 甲基化修饰在骨骼疾病中的研究范畴，也为 DOP 的治疗提供了潜在靶点。未来，针对 ALKBH5-FGF21-m6A 通路的干预策略，有望为糖尿病患者的骨骼健康管理开辟新方向。值得注意的是，研究未涉及动物体内实验及临床样本验证，其转化应用仍需进一步探索。但无论如何，该研究为理解 DOP 的复杂机制打开了新窗口，为后续研究奠定了重要基础。
