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为探究 p16INK4a（p16）在 2 型糖尿病合并颞下颌关节骨关节炎（T2DM-TMJOA）中的作用，研究人员利用动物模型和细胞实验发现，p16 缺失或 MS37452 处理可减轻髁突骨丢失，促进巨噬细胞从 M1 向 M2 极化，机制与恢复线粒体功能、减少铁积累及调节谷胱甘肽（GSH）有关，为 T2DM-TMJOA 治疗提供新方向。
在人体的关节健康领域，颞下颌关节骨关节炎（TMJOA）一直是困扰众多患者的难题，它不仅会导致口面部疼痛、晨僵和咀嚼受限等症状，严重影响生活质量，且常常与代谢性疾病如 2 型糖尿病（T2DM）相伴发，形成 T2DM-TMJOA 共病状态。随着全球 T2DM 患病率的攀升，这种共病带来的临床负担日益加重。然而，目前针对 T2DM-TMJOA 的有效治疗手段却极为有限，因此，深入探究其发病机制并寻找新的治疗靶点迫在眉睫。
为了填补这一研究空白，南京医科大学的研究人员开展了关于 p16INK4a（p16）在 T2DM-TMJOA 中作用的研究。该研究成果发表在《Biomedicine》上，为 T2DM-TMJOA 的治疗提供了重要的理论依据和新的治疗思路。
研究人员主要采用了以下关键技术方法：构建 WT 和 p16 敲除（P16KO）小鼠的 TMJOA、T2DM 及 T2DM-TMJOA 模型；运用 Micro-CT、组织染色（H&E、Masson）、ELISA、免疫荧光、Western blot、RT-qPCR 等技术检测相关指标；进行细胞实验，包括 THP-1 细胞培养、敲低 p16（P16KD）、MS37452 处理以及管形成实验、划痕实验、Transwell 实验等；检测线粒体膜电位（MMP）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、铁离子（Fe2?）、谷胱甘肽（GSH）等细胞代谢相关指标。
3.1 p16 调节 T2DM-TMJOA 小鼠的颞下颌关节骨丢失和巨噬细胞极化
通过动物模型实验发现，T2DM 会加重 TMJ 的骨破坏和炎症，表现为骨密度降低、炎症细胞浸润增多、软骨基质降解等。而 P16KO 小鼠的髁突骨丢失和炎症明显减轻，且 M2 巨噬细胞极化比例增加，表明 p16 缺失可通过诱导 M2 巨噬细胞极化缓解 TMJ 炎症。
3.2 降低 p16 表达可增强炎症微环境中 M2 巨噬细胞水平
在体外实验中，对 THP-1 衍生的巨噬细胞（M0）进行不同处理后发现，P16KD 和 MS37452 处理可抑制 M1 标记物 INOS 的表达，增加 M2 标记物 Arg-1 的表达，证实两者可在高糖诱导的炎症微环境中促进 M2 巨噬细胞极化。
3.3 p16 调节管形成、增殖、迁移和侵袭
通过与 HUVECs 共培养实验发现，P16KD 和 MS37452 处理的巨噬细胞条件培养基可抑制 HUVECs 的管形成、迁移和增殖，降低 VEGFA 和 CD31 的表达，表明 p16 可抑制炎症微环境中的炎症血管生成。
3.4 p16 调节淋巴管形成
与 HLECs 共培养实验表明，P16KD 和 MS37452 处理可抑制 HLECs 的迁移和管形成，下调 LYVE1、Prox1 和 PDPN 的 mRNA 表达，说明 p16 可抑制 TMJ 炎症微环境中的淋巴管形成。
3.5 p16 调节 HBMSCs 的成骨分化
通过与 HBMSCs 共培养实验发现，P16KD 和 MS37452 处理的巨噬细胞条件培养基可增强 HBMSCs 的成骨活性，促进矿化结节形成，增加 ALP 和 RUNX2 的表达，提示 p16 抑制高糖炎症微环境中 HBMSCs 的成骨分化，抑制 p16 可逆转这一效应。
3.6 p16 通过调节线粒体功能和铁积累发挥作用
机制研究表明，p16 与 GSH 存在相互作用，P16KD 和 MS37452 可改善线粒体功能，减少 ROS 生成，降低 Fe2?和 MDA 水平，恢复 GSH 水平，调节 FTH1 和 TFRC 的表达，说明 p16 通过 GSH 调节铁代谢和线粒体稳态，进而影响巨噬细胞极化。
综上所述，该研究表明 p16 在 T2DM-TMJOA 的发病机制中起着关键作用，其缺失或抑制可通过促进巨噬细胞从 M1 向 M2 极化，恢复线粒体功能，减少铁积累，从而缓解髁突骨丢失和炎症。MS37452 作为一种靶向 p16 的药物，展现出了潜在的治疗价值。该研究不仅揭示了 T2DM-TMJOA 的新发病机制，还为其治疗提供了新的靶点和策略，有望为临床治疗带来新的突破。然而，该研究也存在一定局限性，如动物模型与人类疾病的差异、MS37452 的临床应用安全性和有效性等问题，仍需进一步研究验证。
