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为探究 HIV 阳性患者隐孢子虫(Cryptosporidium)感染情况,研究人员对 100 例患者开展其流行特征、遗传多样性及相关危险因素研究。采用多种染色及分子技术检测,发现 9 例感染,以C. hominis和C. parvum为主,且与 CD4?计数等因素相关,为防控提供依据。
隐孢子虫(Cryptosporidium)作为一种寄生于人和动物消化道及呼吸道上皮细胞微绒毛的机会性致病原虫,给免疫功能低下人群带来严重健康威胁。在全球范围内,人类免疫缺陷病毒(HIV)感染导致的获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者中,隐孢子虫病是常见的机会性感染(OI)之一,可引发慢性暴发性腹泻、体重下降、发热等症状,甚至危及生命。尽管抗逆转录病毒疗法(ART)的普及显著改善了 HIV 患者的生存状况,但在资源有限地区,隐孢子虫感染的诊断仍面临挑战,传统显微镜检测灵敏度低,而分子生物学方法因成本高难以广泛应用。此外,隐孢子虫不同种(如Cryptosporidium hominis和Cryptosporidium parvum)的分布特征、遗传多样性及其与宿主免疫状态(如 CD4? T 细胞计数)的关联尚不明确,这些问题制约了针对性防控策略的制定。
为填补上述研究空白,伊朗伊斯兰阿扎德大学卡拉杰分校(Islamic Azad University of Karaj)的研究人员开展了一项针对德黑兰地区 HIV 阳性患者隐孢子虫感染的流行病学、遗传多样性及感染率的研究,相关成果发表在《Diagnostic Microbiology and Infectious Disease》。该研究旨在明确隐孢子虫在 HIV 阳性人群中的感染现状、遗传组成,分析其与社会人口学特征、临床症状、治疗依从性及免疫参数的关系,为优化资源有限地区的诊断方法和防控策略提供科学依据。
研究人员从 2023 年 7 月至 2024 年 1 月,在德黑兰伊玛目霍梅尼医院综合体(Imam Khomeini Hospital Complex)招募了 100 例怀疑合并机会性感染的 HIV 阳性患者,采集粪便、诱导痰和鼻咽拭子标本。研究采用了三项关键技术方法:一是对比改良抗酸染色、金胺 - 酚染色和萨维奇染色三种传统染色技术,筛选隐孢子虫卵囊检测的最佳方法;二是优化 DNA 提取前处理流程,通过冻融循环、珠磨和超声处理破坏卵囊壁,释放子孢子 DNA;三是利用巢式 PCR-RFLP 技术(限制性片段长度多态性)结合两种限制性内切酶,对隐孢子虫进行种水平的基因分型,并通过测序构建系统发育树,与 GenBank 中已知基因型比对。
研究结果
感染率与样本分布
通过巢式 PCR-RFLP 技术,在 100 例患者中检测到 9 例隐孢子虫阳性(感染率 9%),其中粪便标本阳性 9 例,痰标本阳性 3 例,鼻咽拭子阳性 3 例,提示呼吸道可能存在隐孢子虫定植或传播途径。
遗传多样性分析
基因分型结果显示,5 例为Cryptosporidium hominis(人隐孢子虫),4 例为Cryptosporidium parvum(小隐孢子虫),两者均为免疫缺陷人群中主要致病种。系统发育分析表明,检测到的基因型与 GenBank 中已报道的流行株高度同源。
危险因素与临床关联
统计分析显示,年龄、教育程度、治疗依从性(是否接受 ART)与机会性感染发生率显著相关(P<0.01)。CD4? T 细胞计数 < 200 cells/μL 的患者更易发生包括隐孢子虫在内的机会性感染(P<0.001)。隐孢子虫阳性患者体重下降和胃肠道症状(如腹泻、腹痛)的发生率显著高于阴性患者。
结论与讨论
本研究首次系统报道了伊朗德黑兰 HIV 阳性人群中隐孢子虫的感染特征,证实C. hominis和C. parvum为主要流行种,且感染率与宿主免疫状态密切相关。研究发现,传统染色技术中改良抗酸染色对粪便标本的检测灵敏度较高,为资源有限地区提供了经济实用的诊断方案;优化的 DNA 前处理方法有效提高了分子检测的成功率,为低资源环境下开展病原基因分型提供了技术参考。此外,研究揭示的 CD4?细胞计数与感染风险的强相关性,进一步支持对 HIV 患者进行免疫监测的重要性。
尽管硝唑尼特(Nitazoxanide)是目前唯一获 FDA 批准的隐孢子虫病治疗药物,但在 HIV 患者中疗效有限且在伊朗不可用,因此早期诊断和免疫支持治疗成为改善预后的关键。本研究结果为伊朗及类似资源背景地区制定 HIV 合并隐孢子虫感染的筛查策略、优化患者管理提供了流行病学依据,同时呼吁加强对隐孢子虫病的监测和分子流行病学研究,以应对其在免疫缺陷人群中的潜在威胁。研究局限性在于样本量较小且为单中心研究,未来需扩大样本覆盖范围,进一步探讨隐孢子虫在 HIV 患者中的传播动力学及长期临床影响。