豆花蓟马田间种群杀虫剂抗性机制的转录组分析

【字体: 时间:2025年05月19日 来源:Ecotoxicology and Environmental Safety 6.2

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  为探究豆花蓟马(Megalurothrips usitatus)抗药性及解毒酶作用,研究人员对 4 个田间种群开展杀虫剂敏感性监测、酶活性测定及转录组分析。发现不同种群抗性差异显著,CYP450、UGT 等酶活性与基因表达相关,WGCNA 筛选出关键基因,为抗性管理提供依据。

  
在农业生产的舞台上,豆花蓟马(Megalurothrips usitatus)宛如一个顽固的 “破坏者”,在亚洲热带地区对豆类作物大肆侵害,甚至在北美等地也站稳了脚跟。由于其体型小巧、习性隐蔽,农民不得不频繁使用化学杀虫剂,然而这却导致了严重的抗药性问题。海南等地曾出现因抗药性导致防治失效,农民误用禁药,进而引发食品安全风险和经济损失的情况。为了破解豆花蓟马抗药性的谜团,探寻更有效的防治策略,中国的研究人员开展了深入研究,相关成果发表在《Ecotoxicology and Environmental Safety》。

研究人员从中国南方四个豆花蓟马危害严重的地区(海南崖州、广东徐闻、广西合浦、福建南京)采集了田间种群,并以海南三亚室内饲养的敏感种群(Lab-S)作为对照。主要采用了以下关键技术方法:一是生物测定法,运用改良叶管残留法测试了 10 种杀虫剂(包括多杀霉素、β- 氯氰菊酯等)对不同种群的致死中浓度(LC??),以此评估抗性水平;二是酶活性测定,借助试剂盒检测了细胞色素 P450(CYP450)、尿苷二磷酸糖基转移酶(UGT)、谷胱甘肽 - S - 转移酶(GST)、羧酸酯酶(CarE)和乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性;三是转录组测序与分析,对各群体进行 RNA 测序,结合加权基因共表达网络分析(WGCNA)筛选关键基因模块和枢纽基因。

3.1 区域抗性差异


通过生物测定发现,不同种群对杀虫剂的抗性表现出显著差异。徐闻(XW)种群抗性最强,对 5 种杀虫剂产生抗性,抗性倍数(RR)在 7.17 至 42.90 之间,其中对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的 RR 高达 42.90;崖州(YZ)种群对 2 种杀虫剂有抗性,南京(NJ)种群对 1 种杀虫剂有抗性;合浦(HP)种群最为敏感,对多数杀虫剂的 RR 低于 0.5。

3.2 CYP450 活性与基因表达


CYP450 活性在 YZ 种群中最高,与 Lab-S 种群无显著差异,而 NJ、HP、XW 种群活性较低。转录组分析显示,YZ 种群中有 44 个 CYP450 基因高表达,且Musi_010089Musi_009309Musi_005135这 3 个基因与 CYP450 活性呈显著正相关,在 YZ 种群中的表达量显著高于其他种群。

3.3 UGT 活性与基因表达


UGT 活性在 YZ 种群中最高,HP 种群最低。YZ 种群的 19 个 UGT 基因均高表达,其中MusiPT_018563仅在 YZ 种群中高表达,但整体上 UGT 酶活性与 RNA 表达无显著整体相关性,部分 UGT 基因间存在正相关。

3.4 AChE 和 CarE 活性与基因表达


AChE 活性在 YZ 和 Lab-S 种群中较高,XW、NJ、HP 种群较低;CarE 活性在 XW 种群中显著最高。CCE 基因表达在 HP 种群中高表达基因数最多,MusiPT_021594与 AChE 活性正相关,MusiPT_006325与 CarE 活性正相关,MusiPT_006095MusiPT_003750与 CarE 活性负相关。

3.5 GST 活性与基因表达


GST 活性在 XW 和 HP 种群中最高,YZ 和 Lab-S 种群较低。YZ 种群的 GST 基因普遍高表达,HP 和 XW 种群中MusiPT_006105MusiPT_020024MusiPT_021660与 GST 活性呈显著正相关。

3.6 WGCNA 分析


WGCNA 分析识别出 MEblue、MEturquoise、MEbrown 三个模块与杀虫剂抗性相关。MEblue 模块与诺瓦隆的 LC??呈正相关,枢纽基因包括 CYP450、GST、CCE 基因;MEturquoise 模块与啶虫脒的 LC??正相关,以 CYP450 基因为主;MEbrown 模块与啶虫脒 LC??正相关,与多种杀虫剂 LC??负相关,枢纽基因包含 UGT 和 CYP450 基因。

研究结论表明,豆花蓟马不同田间种群的杀虫剂抗性存在显著差异,解毒酶活性与基因表达的变化是抗性形成的重要机制。其中,CYP450、UGT、CarE、AChE 和 GST 等解毒酶通过酶活性增强和相关基因表达上调参与抗性,WGCNA 筛选出的 10 个 CYP450 基因和 3 个 UGT 基因作为枢纽基因,在抗性网络中起关键作用。

这项研究不仅揭示了豆花蓟马抗药性的分子机制,为理解其抗性进化提供了理论依据,更重要的是为田间抗性管理提供了切实的指导。例如,根据不同地区种群的抗性谱,合理轮换使用杀虫剂(如在 XW 地区推荐多杀霉素和诺瓦隆),避免单一药剂的过度使用,有助于延缓抗药性的发展。同时,研究识别的关键基因和通路,为开发新的抗药性监测靶点和高效低毒药剂提供了方向,对保障豆类作物的安全生产和食品安全具有重要意义。

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